微生物和生物醫學(xué)實(shí)驗室生物安全通用準則WS 233-2002 公司新聞新聞動(dòng)態(tài) > 首頁(yè) >
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微生物和生物醫學(xué)實(shí)驗室生物安全通用準則WS 233-2002 批準日期 2002-12-03 實(shí)施日期 2003-08-01 中華人民共和國衛生行業(yè)標準（WS 233-2002） 微生物和生物醫學(xué)實(shí)驗室生物安全通用準則 General biosafety standard for microbiological and biomedical laboratories 1 范圍 本標準規定了微生物和生物醫學(xué)實(shí)驗室生物安全防護的基本原則、實(shí)驗室的分級、各級實(shí)驗室的基本要求。本標準為最低要求?！”緲藴蔬m用于疾病預防控制機構、醫療保健、科研機構。 2 規范性引用文件 下列文件中的條款通過(guò)本標準的引用而成為本標準的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單（不包括勘誤的內容）或修訂版均不適用于本標準，然而，鼓勵根據本標準達成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標準。 GB 14925—2001 實(shí)驗動(dòng)物環(huán)境及設施 GB/T 16803—1997 采暖、通風(fēng)、空調、凈化設備術(shù)語(yǔ) GB 50073—2001 潔凈廠(chǎng)房設計規范 JGJ 71—1990 潔凈室施工及驗收規范 3 定義 本標準采用下列定義 3.1 實(shí)驗室生物安全防護biosafety protection for laboratories 實(shí)驗室工作人員所處理的實(shí)驗對象含有致病的微生物及其毒素時(shí)，通過(guò)在實(shí)驗室設計建造、使用個(gè)體防護設置、嚴格遵從標準化的工作及操作程序和規程等方面采取綜合措施，確保實(shí)驗室工作人員不受實(shí)驗對象侵染，確保周?chē)h(huán)境有受其污染。 3.2 微生物危害評估hazard assessment for microbes 對實(shí)驗微生物和毒素可能給人或環(huán)境帶來(lái)的危害所進(jìn)行的評估。 3.3 氣溶膠aerosol 懸浮于氣體介質(zhì)中粒徑一般為0.001μm~1000μm的固體、液體微小粒子形成的膠溶狀態(tài)分散體系。 3.4 生物安全柜biosafety cabinet 處理危險性微生物時(shí)所用的箱形空氣凈化安全裝置。 3.5 I級生物安全柜class Ⅰbiosafety cabinet 至少裝置一個(gè)高效空氣過(guò)濾器對排氣進(jìn)行凈化，工作時(shí)柜正面玻璃推拉窗打開(kāi)一半，上部為觀(guān)察窗，下部為操作窗口，外部空氣由操作窗口吸進(jìn)，而不可能由操作窗口逸出。工作狀態(tài)時(shí)保證工作人員不受侵害，但不保證實(shí)驗對象不受污染。 3.6 II級生物安全柜class Ⅱbiosafety cabinet 至少裝置一個(gè)高效空氣過(guò)濾器對排氣進(jìn)行凈化，工作空間為經(jīng)高效過(guò)濾器凈化的無(wú)渦流的單向流空氣。工作時(shí)正面玻璃推拉窗打開(kāi)一半，上部為觀(guān)察窗，下部操作窗口。外部空氣由操作窗口吸進(jìn)，而不可能由操作窗口逸出。工作狀態(tài)下遵守操作規程時(shí)既保證工作人員不受侵害，也保證實(shí)驗對象不受污染。 3.7 III級生物安全柜class III biosafety cabinet 至少裝置一個(gè)高效空氣過(guò)濾器對排氣進(jìn)行凈化，工作空間為經(jīng)高效過(guò)濾器凈化的無(wú)渦流的單向流空氣，正面上部為觀(guān)察窗，下部為手套箱式操作口。箱內對外界保持負壓可確保人體與柜內物品完全隔絕。 3.8 物理抑制設備physical containment device 用物理或機械方法防止致病微生物逸出的設備。 3.9 高效空氣過(guò)濾器HEPA(high efficiency particulate air) filter 在額定風(fēng)量下，對粒徑大于等于0.3μm的粒子捕集效率在99.97%以上及氣流阻力在245Pa以下的空氣過(guò)濾器。 3.10 相對壓強relative pressure 絕對壓強減去大氣壓強之值。 4 實(shí)驗室生物安全防護的基本原則 4.1 總則 4.1.1 實(shí)驗室生物安全防護的內容包括安全設備、個(gè)體防護裝置和措施，實(shí)驗室的特殊設計和建設要求，嚴格的管理制度和標準化的操作程序及規程。 4.1.2 應將每一特定實(shí)驗室從立項、建設到使用維護的全過(guò)程中有關(guān)生物安全防護綜合措施的內容編入實(shí)驗室的生物安全手冊中。必須設有專(zhuān)職的生物安全負責人。 4.1.3 生物安全防護實(shí)驗室根據不同的微生物和防護要求分為四個(gè)生物安全防護級別。 4.2 安全設備和個(gè)體防護安全設備和個(gè)體防護是確保實(shí)驗室工作人員與致病微生物及其毒素直接接觸的一級屏障。 4.2.1 生物安全柜是最重要的安全設備，形成最主要的防護屏障。實(shí)驗室應按要求分別配備Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級生物安全柜。所有可能使致病微生物及其毒素濺出或產(chǎn)生氣溶膠的操作，除實(shí)際上不可實(shí)施外，都必須在生物安全柜內進(jìn)行。不得用超凈工作臺代替生物安全柜。 4.2.2 必要時(shí)實(shí)驗室應配備其他安全設備，如設置配有排風(fēng)凈化裝置的排氣罩等，或采用其他不使致病微生物逸出確保安全的設備。 4.2.3 實(shí)驗室所配備的離心機應在生物安全柜或本標準4.2.2中所指的其他安全設備中使用，否則必須使用安全密封的專(zhuān)用離心杯。 4.2.4 必須給實(shí)驗室工作人員配備必要的個(gè)體防護用品。 4.3 實(shí)驗室設計與建造的特殊要求包括:實(shí)驗室的選址、平面布置、圍護結構、通風(fēng)空調、安全裝置及特殊設備等設計與建造的特殊要求。 4.4 安全操作規程 4.4.1 本標準針對不同等級的生物安全防護實(shí)驗室所規定的安全操作規程，包括標準的安全操作規程和特殊的安全操作規程（見(jiàn)附錄A），必須在實(shí)驗室的生物安全手冊中明列并加以執行。 4.4.2 針對不同的微生物及其毒素應補充規定相應的特殊安全操作規程，也應在各實(shí)驗室的生物安全手冊中明列并加以執行。 4.5 致病微生物及其毒素在實(shí)驗室之間的傳遞致病微生物及其毒素在實(shí)驗室之間的傳遞必須嚴格按照國家現行有關(guān)管理辦法執行。 4.6 管理制度 4.6.1 實(shí)驗室基本管理 4.6.1.1 實(shí)驗室內的布置和準入 a）在主實(shí)驗室應合理設置清潔區、半污染區和污染區； b）非實(shí)驗有關(guān)人員和物品不得進(jìn)入實(shí)驗室； c）在實(shí)驗室內不得進(jìn)食和飲水，或者進(jìn)行其他與實(shí)驗無(wú)關(guān)的活動(dòng)； d）實(shí)驗室工作人員、外來(lái)合作者、進(jìn)修和學(xué)習人員在進(jìn)入實(shí)驗室及其崗位之前必須經(jīng)過(guò)實(shí)驗室主任的批準。 4.6.1.2 實(shí)驗室工作人員的資格和培訓 a）實(shí)驗室的工作人員必須是受過(guò)專(zhuān)業(yè)教育的技術(shù)人員。在獨立進(jìn)行工作前還需在中高級實(shí)驗技術(shù)人員指導下進(jìn)行上崗培訓，達到合格標準，方可開(kāi)始工作； b）實(shí)驗室的工作人員必須被告知實(shí)驗室工作的潛在危險并接受實(shí)驗室安全教育，自愿從事實(shí)驗室工作； c）實(shí)驗室的工作人員必須遵守實(shí)驗室的所有制度、規定和操作規程。 d）三級和四級生物安全防護實(shí)驗室的工作人員在開(kāi)始工作前必須留本底血清進(jìn)行有關(guān)檢測，以后定期復檢。如有疫苗必須進(jìn)行免疫注射。 4.6.2 實(shí)驗室特殊管理為避免和處理源于不安全操作引起的意外事故，必須嚴格執行以下原則： 4.6.2.1 針對可能的的危險因素，設計保證安全的工作程序。 4.6.2.2 事前進(jìn)行有效的培訓和摸擬訓練。 4.6.2.3 對于意外事故要能夠提供包括緊急救助或專(zhuān)業(yè)性保健治療的措施，足以應付緊急情況。 4.6.2.4 實(shí)驗室事故處理：工作人員在操作過(guò)程中發(fā)生意外，如針刺和切傷、皮膚污染、感染性標本濺及體表和口鼻眼內、衣物污染、污染試驗臺面等均視為安全事故。應視事故類(lèi)型等不同情況，立即進(jìn)行緊急處理。具體措施必須形成書(shū)面文件并嚴格遵守執行。在緊急處理的同時(shí)必須向有關(guān)專(zhuān)家和領(lǐng)導匯報，并詳細記錄事故經(jīng)過(guò)和損傷的具體部位和程度等，由專(zhuān)家評估是否需要進(jìn)行預防性治療。 4.6.2.5 應填寫(xiě)正式的事故登記表，并按規定報告給國家相應級別的衛生主管部門(mén)。 4.7 微生物危害評估當建設使用傳染性或有潛在傳染性材料的實(shí)驗室前，必須進(jìn)行微生物危害評估。應依據傳染性微生物致病能力的程度、傳播途徑、穩定性、感染劑量、操作時(shí)的濃度和規模、實(shí)驗對象的來(lái)源、是否有動(dòng)物實(shí)驗數據、是否有有效的預防和治療方法等諸因素進(jìn)行微生物危害評估。 4.7.1 通過(guò)微生物危害評估確定對象微生物應在哪一級的生物安全防護實(shí)驗室中進(jìn)行操作。 4.7.2 根據危害評估結果，制定相應的操作規程、實(shí)驗室管理制度和緊急事故處理辦法，必須形成書(shū)面文件并嚴格遵守執行。 5 實(shí)驗室的分類(lèi)、分級及適用范圍 5.1 分類(lèi) 5.1.1 一般生物安全防護實(shí)驗室(不使用實(shí)驗脊椎動(dòng)物和昆蟲(chóng))。 5.1.2 實(shí)驗脊椎動(dòng)物生物安全防護實(shí)驗室。 5.2 分級每類(lèi)生物安全防護實(shí)驗室根據所處理的微生物及其毒素的危害程度各分為四級。各級實(shí)驗室的生物安全防護要求依次為：一級最低，四級最高。 5.3 適用范圍 5.3.1 一般生物安全防護實(shí)驗室 5.3.1.1 一級生物安全防護實(shí)驗室實(shí)驗室結構和設施、安全操作規程、安全設備適用于對健康成年人已知無(wú)致病作用的微生物，如用于教學(xué)的普通微生物實(shí)驗室等。 5.3.1.2 二級生物安全防護實(shí)驗室實(shí)驗室結構和設施、安全操作規程、安全設備適用于對人或環(huán)境具有中等潛在危害的微生物。 5.3.1.3 三級生物安全防護實(shí)驗室 實(shí)驗室結構和設施、安全操作規程、安全設備適用于主要通過(guò)呼吸途徑使人傳染上嚴重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素，通常已有預防傳染的疫苗?！“滩〔《镜难芯?血清學(xué)實(shí)驗除外)應在三級生物安全防護實(shí)驗室中進(jìn)行。5.3.1.4 四級生物安全防護實(shí)驗室實(shí)驗室結構和設施、安全操作規程、安全設備適用于對人體具有高度的危險性，通過(guò)氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明，目前尚無(wú)有效的疫苗或治療方法的致病微生物及其毒素。與上述情況類(lèi)似的不明微生物，也必須在四級生物安全防護實(shí)驗室中進(jìn)行。待有充分數據后再決定此種微生物或毒素應在四級還是在較低級別的實(shí)驗室中處理。 5.3.2 實(shí)驗脊椎動(dòng)物生物安全防護實(shí)驗室，其適用微生物范圍與同級的一般生物安全防護實(shí)驗室相同。 6 一般生物安全防護實(shí)驗室的基本要求 6.1 一級生物安全防護實(shí)驗室 6.1.1 安全設備和個(gè)體防護 6.1.1.1 一般無(wú)須使用生物安全柜等專(zhuān)用安全設備。 6.1.1.2 工作人員在實(shí)驗時(shí)應穿工作服，戴防護眼鏡。 6.1.1.3 工作人員手上有皮膚破損或皮疹時(shí)應戴手套。 6.1.2 實(shí)驗室設計和建造的特殊要求 6.1.2.1 每個(gè)實(shí)驗室應設洗手池，宜設置在靠近出口處。 6.1.2.2 實(shí)驗室圍護結構內表面應易于清潔。地面應防滑、無(wú)縫隙，不得鋪設地毯。 6.1.2.3 實(shí)驗臺表面應不透水，耐腐蝕、耐熱。 6.1.2.4 實(shí)驗室中的家具應牢固。為易于清潔，各種家具和設備之間應保持生物廢棄物容器的臺(架)。 6.1.2.5 實(shí)驗室如有可開(kāi)啟的窗戶(hù)，應設置紗窗。 6.2 二級生物安全防護實(shí)驗室 6.2.1 安全設備和個(gè)體防護 6.2.1.1 可能產(chǎn)生致病微生物氣溶膠或出現濺出的操作均應在生物安全柜(II級生物安全柜為宜)或其他物理抑制設備中進(jìn)行，并使用個(gè)體防護設備。 6.2.1.2 處理高濃度或大容量感染性材料均必須在生物安全柜(II級生物安全柜為宜)或其他物理抑制設備中進(jìn)行，并使用個(gè)體防護設備。上述材料的離心操作如果使用密封的離心機轉子或安全離心杯，且它們只在生物安全柜中開(kāi)閉和裝載感染性材料，則可在實(shí)驗室中進(jìn)行。 6.2.1.3 當微生物的操作不可能在生物安全柜內進(jìn)行而必須采取外部操作時(shí)，為防止感染性材料濺出或霧化危害，必須使用面部保護裝置(護目鏡、面罩、個(gè)體呼吸保護用品或其他防濺出保護設備)。 6.2.1.4 在實(shí)驗室中應穿著(zhù)工作服或罩衫等防護服。離開(kāi)實(shí)驗室時(shí)，防護服必須脫下并留在實(shí)驗室內。不得穿著(zhù)外出，更不能攜帶回家。用過(guò)的工作服應先在實(shí)驗室中消毒，然后統一洗滌或丟棄。 6.2.1.5 當手可能接觸感染材料、污染的表面或設備時(shí)應戴手套。如可能發(fā)生感染性材料的溢出或濺出，宜戴兩副手套。不得戴著(zhù)手套離開(kāi)實(shí)驗室。工作完全結束后方可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使用。 6.2.2 實(shí)驗室設計和建造的特殊要求 6.2.2.1 生物安全防護二級實(shí)驗室必須滿(mǎn)足本標準6.1.2中各款的要求。 6.2.2.2 應設置實(shí)施各種消毒方法的設施，如高壓滅菌鍋、化學(xué)消毒裝置等對廢棄物進(jìn)行處理。 6.2.2.3 應設置洗眼裝置。 6.2.2.4 實(shí)驗室門(mén)宜帶鎖、可自動(dòng)關(guān)閉。 6.2.2.5 實(shí)驗室出口應有發(fā)光指示標志。 6.2.2.6 實(shí)驗室宜有不少于每小時(shí)3～4次的通風(fēng)換氣次數。 6.3 三級生物安全防護實(shí)驗室 6.3.1 安全設備和個(gè)體防護 6.3.1.1 實(shí)驗室中必須安裝Ⅱ級或Ⅱ級以上生物安全柜。 6.3.1.2 所有涉及感染性材料的操作應在生物安全柜中進(jìn)行。當這類(lèi)操作不得不在生物安全柜外進(jìn)行時(shí)，必須采用個(gè)體防護與使用物理抑制設備的綜合防護措施。 6.3.1.3 在進(jìn)行感染性組織培養、有可能產(chǎn)生感染性氣溶膠的操作時(shí)，必須使用個(gè)體防護設備。 6.3.1.4 當不能安全有效地將氣溶膠限定在一定范圍內時(shí)，應使用呼吸保護裝置。 6.3.1.5 工作人員在進(jìn)入實(shí)驗室工作區前，應在專(zhuān)用的更衣室(或緩沖間)穿著(zhù)背開(kāi)式工作服或其他防護服。工作完畢必須脫下工作服，不得穿工作服離開(kāi)實(shí)驗室?？稍俅问褂玫墓ぷ鞣仨毾认竞笄逑?。 6.3.1.6 工作時(shí)必須戴手套(兩副為宜)。一次性手套必須先消毒后丟棄。 6.3.1.7 在實(shí)驗室中必須配備有效的消毒劑、眼部清洗劑或生理鹽水，且易于取用?？膳鋫鋺彼幤?。 6.3.2 實(shí)驗室設計和建造的特殊要求 6.3.2.1 選址三級生物安全防護實(shí)驗室可與其他用途房屋設在一棟建筑物中，但必須自成一區。該區通過(guò)隔離門(mén)與公共走廊或公共部位相隔。 6.3.2.2 平面布局 a)三級生物安全防護實(shí)驗室的核心區包括實(shí)驗間及與之相連的緩沖間?！)緩沖間形成進(jìn)入實(shí)驗間的通道。必須設兩道連鎖門(mén)，當其中一道門(mén)打開(kāi)時(shí)，另一道門(mén)自動(dòng)處于關(guān)閉狀態(tài)。如使用電動(dòng)連鎖裝置，斷電時(shí)兩道門(mén)均必須處于可打開(kāi)狀態(tài)。在緩沖間可進(jìn)行二次更衣。 c)當實(shí)驗室的通風(fēng)系統不設自動(dòng)控制裝置時(shí)，緩沖間面積不宜過(guò)大，不宜超過(guò)實(shí)驗間面積的八分之一?！)Ⅱ級或Ⅲ級生物安全柜的安裝位置應遠離實(shí)驗間入口，避開(kāi)工作人員頻繁走動(dòng)的區域，且有利于形成氣流由“清潔”區域流向“污染”區域的氣流流型。 6.3.2.3 圍護結構 a)實(shí)驗室(含緩沖間)圍護結構內表面必須光滑耐腐蝕、防水，以易于消毒清潔。所有縫隙必須加以可靠密封?！)實(shí)驗室內所有的門(mén)均可自動(dòng)關(guān)閉?！)除觀(guān)察窗外，不得設置任何窗戶(hù)。觀(guān)察窗必須為密封結構，所用玻璃為不碎玻璃?！)地面應無(wú)滲漏，光潔但不滑。不得使用地磚和水磨石等有縫隙地面。 e)天花板、地板、墻間的交角均為圓弧形且可靠密封，施工時(shí)應防止昆蟲(chóng)和老鼠鉆進(jìn)墻腳。 6.3.2.4 通風(fēng)空調 a)必須安裝獨立的通風(fēng)空調系統以控制實(shí)驗室氣流方向和壓強梯度。該系統必須確保實(shí)驗室使用時(shí)，室內空氣除通過(guò)排風(fēng)管道經(jīng)高效過(guò)濾排出外，不得從實(shí)驗室的其他部位或縫隙排向室外；同時(shí)確保實(shí)驗室內的氣流由“清潔”區域流向“污染”區域。進(jìn)風(fēng)口和排風(fēng)口的布局應使實(shí)驗區內的死空間降低到最小程度?！)通風(fēng)空調系統為直排系統，不得采用部分回風(fēng)系統?！)環(huán)境參數：相對于實(shí)驗室外部，實(shí)驗室內部保持負壓。實(shí)驗間的相對壓強以－30Pa～－40Pa為宜，緩沖間的相對壓強以－15Pa～－20Pa為宜。實(shí)驗室內的溫、濕度以控制在人體舒適范圍為宜，或根據工藝要求而定。實(shí)驗室內的空氣潔凈度以GB 50073—2001《潔凈廠(chǎng)房設計規范》中所定義的七級至八級為宜。實(shí)驗室人工照明應均勻，不眩目，照度不低于500lx?！)為確保實(shí)驗室內的氣流由“清潔”區域流向“污染”區域，實(shí)驗室內不應使用雙側均勻分布的排風(fēng)口布局。不應采用上送上排的通風(fēng)設計。由生物安全柜排出的經(jīng)內部高效過(guò)濾的空氣可通過(guò)系統的排風(fēng)管直接排至大氣，也可送入建筑物的排風(fēng)系統。應確保生物安全柜與排風(fēng)系統的壓力平衡?！)實(shí)驗室的進(jìn)風(fēng)應經(jīng)初、中、高效三級過(guò)濾?！)實(shí)驗室的排風(fēng)必須經(jīng)高效過(guò)濾或加其他方法處理后，以不低于12m／s的速度直接向空中排放。該排風(fēng)口應遠離系統進(jìn)風(fēng)口位置。處理后的排風(fēng)也可排入建筑物的排風(fēng)管道，但不得被送回到該建筑物的任何部位?！)進(jìn)風(fēng)和排風(fēng)高效過(guò)濾器必須安裝在實(shí)驗室設在圍護結構上的風(fēng)口里，以避免污染風(fēng)管。 h)實(shí)驗室的通風(fēng)系統中，在進(jìn)風(fēng)和排風(fēng)總管處應安裝氣密型調節閥門(mén)，必要時(shí)可完全關(guān)閉以進(jìn)行室內化學(xué)熏蒸消毒。 i）實(shí)驗室的通風(fēng)系統中所使用的所有部件均必須為氣密型。所使用的高效過(guò)濾器不得為木框架。 j）應安裝風(fēng)機啟動(dòng)自動(dòng)聯(lián)鎖裝置，確保實(shí)驗室啟動(dòng)時(shí)先開(kāi)排風(fēng)機后開(kāi)送風(fēng)機。關(guān)閉時(shí)先關(guān)送風(fēng)機后關(guān)排風(fēng)機?！)不得在實(shí)驗室內安裝分體空調器。 6.3.2.5 安全裝置及特殊設備 a)必須在主實(shí)驗室內設置Ⅱ級或Ⅲ級生物安全柜。其安裝位置應滿(mǎn)足6.3.2.5 d)中的要求?！)連續流離心機或其他可能產(chǎn)生氣溶膠的設備應置于物理抑制設備之中，該裝置應能將其可能產(chǎn)生的氣溶膠經(jīng)高效過(guò)濾器過(guò)濾后排出。在實(shí)驗室內所必須設置的所有其他排風(fēng)裝置(通風(fēng)櫥、排氣罩等)的排風(fēng)均必須經(jīng)過(guò)高效過(guò)濾器過(guò)濾后方可排出。其室內布置應有利于形成氣流由“清潔”區域流向“污染”區域的氣流流型?！)實(shí)驗室中必須設置不產(chǎn)生蒸汽的高壓滅菌鍋或其他消毒裝置?！)實(shí)驗間與外部應設置傳遞窗。傳遞窗雙門(mén)不得同時(shí)打開(kāi)，傳遞窗內應設物理消毒裝置。感染性材料必須放置在密閉容器中方可通過(guò)傳遞窗傳遞。 e）必須在實(shí)驗室入口處的顯著(zhù)位置設置壓力顯示報警裝置，顯示實(shí)驗間和緩沖間的負壓狀況。當負壓指示偏離預設區間必須能通過(guò)聲、光等手段向實(shí)驗室內外的人員發(fā)出警報.可在該裝置上增加送、排風(fēng)高效過(guò)濾器氣流阻力的顯示?！）實(shí)驗室啟動(dòng)工作期間不能停電。應采用雙路供電電源。如難以實(shí)現，則應安裝停電時(shí)可自動(dòng)切換的后備電源或不間斷電源，對關(guān)鍵設備(生物安全柜、通風(fēng)櫥、排氣罩以及照明等)供電。 g)可在緩沖間設洗手池：洗手池的供水截門(mén)必須為腳踏、肘動(dòng)或自動(dòng)開(kāi)關(guān)。洗手池如設在主實(shí)驗室，下水道必須與建筑物的下水管線(xiàn)分離，且有明顯標志。下水必須經(jīng)過(guò)消毒處理。洗手池僅供洗手用，不得向內傾倒任何感染性材料。供水管必須安裝防回流裝置。不得在實(shí)驗室內安設地漏。 6.3.2.6 其他 a)實(shí)驗臺表面應不透水，耐腐蝕、耐熱?！)實(shí)驗室中的家具應牢固。為易于清潔，各種家具和設備之間應保持一定間隙。應有專(zhuān)門(mén)放置生物廢棄物容器的臺(架)。家具和設備的邊角和突出部位應光滑、無(wú)毛刺，以圓弧形為宜?！)所需真空泵應放在實(shí)驗室內。真空管線(xiàn)必須裝置在線(xiàn)高效過(guò)濾器?！)壓縮空氣等鋼瓶應放在實(shí)驗室外。穿過(guò)圍護結構的管道與圍護結構之間必須用不收縮的密封材料加以密封。氣體管線(xiàn)必須裝置在線(xiàn)高效過(guò)濾器和防回流裝置?！)實(shí)驗室中應設置洗眼裝置?！)實(shí)驗室出口應有發(fā)光指示標志?！)實(shí)驗室內外必須設置通訊系統?！)實(shí)驗室內的實(shí)驗記錄等資料應通過(guò)傳真機發(fā)送至實(shí)驗室外。 6.4 四級生物安全防護實(shí)驗室 四級生物安全防護實(shí)驗室分為：安全柜型實(shí)驗室和穿著(zhù)正壓服型實(shí)驗室。在安全柜型實(shí)驗室中，所有微生物的操作均在Ⅲ級生物安全柜中進(jìn)行。在穿著(zhù)正壓服型實(shí)驗室中，工作人員必須穿著(zhù)特殊的正壓服式保護服裝。 6.4.1 安全設備和個(gè)體防護 6.4.1.1 在實(shí)驗室中所有感染性材料的操作都必須在Ⅲ級生物安全柜中進(jìn)行。如果工作人員穿著(zhù)整體的由生命維持系統供氣的正壓工作服，則相關(guān)操作可在Ⅱ級生物安全柜中進(jìn)行。 6.4.1.2 所有工作人員進(jìn)入實(shí)驗室時(shí)都必須換上全套實(shí)驗室服裝，包括內衣、內褲、襯衣或連衫褲、鞋和手套等。所有這些實(shí)驗室保護服在淋浴和離開(kāi)實(shí)驗室前均必須在更衣室內脫下。 6.4.2 安全柜型實(shí)驗室設計和建造的特殊要求 6.4.2.1 選址。實(shí)驗室應建造在獨立的建筑物內或實(shí)驗室建筑物內獨立的區域。 6.4.2.2 平面布局 a)實(shí)驗室核心區域由安放有Ⅲ級生物安全柜的房間(安全柜室)和進(jìn)入通道組成。進(jìn)入通道至少有三個(gè)部分，依次為外更衣室、淋浴室和內更衣室。任何相鄰的門(mén)之間都有自動(dòng)連鎖裝置，防止兩個(gè)相鄰的門(mén)被同時(shí)打開(kāi)。對于不能從更衣室攜帶進(jìn)出安全柜室的材料、物品和器材，應在安全柜室墻上設置具有雙門(mén)結構的高壓滅菌鍋，并有浸泡消毒槽、熏蒸室或帶有消毒裝置的通風(fēng)傳遞窗，以便進(jìn)行傳遞或消毒。必須設置帶氣閘室的緊急出口通道?！)安全柜室四周可設置緩沖區，為環(huán)形走廊或緩沖房間，屬核心區域的一部分。緩沖區建設要求同三級生物安全防護實(shí)驗室。 6.4.2.3 圍護結構 a) 安全柜房間和內側更衣室的墻壁、地板、天花板等內部應形成密封的內殼。地板應整體密封，墻角成圓弧形。房間的內表面應防水、耐腐蝕。結構內所有的縫隙都應密封。盡量減小安全柜室和內更衣室門(mén)周?chē)目p隙并可密封以利消毒。安全柜室地板上所有的下水管都直接通往液體消毒系統，下水道口和其他服務(wù)管線(xiàn)安裝高效過(guò)濾器并防止害蟲(chóng)進(jìn)入。 b）進(jìn)入實(shí)驗室的門(mén)可自動(dòng)關(guān)閉，可以上鎖。所有在實(shí)驗室內外傳遞物品的設備都必須為雙開(kāi)門(mén)結構，兩門(mén)之間也必須有自動(dòng)連鎖裝置?！)任何窗戶(hù)都要求防破碎并密封?！)在實(shí)驗室的墻洞上安裝用于對Ⅲ級生物安全柜和安全柜室傳遞出來(lái)的物品進(jìn)行消毒的雙開(kāi)門(mén)高壓滅菌鍋。其外門(mén)在實(shí)驗室外開(kāi)啟?？p隙必須良好密封。 6.4.2.4 通風(fēng)空調 a)必須安裝精心設計建造的直排式通風(fēng)系統。該系統進(jìn)風(fēng)和排風(fēng)設計應確保定向的氣流由最小危險區流向最大潛在危險區。進(jìn)風(fēng)口和排風(fēng)口的布局應使實(shí)驗區內的死空間降低到最小程度?！)必須監測相鄰區域的壓差和氣流流向，并安裝報警器。在外更衣室的入口處安裝壓強儀表盤(pán)，顯示和監測實(shí)驗室內各區的壓強或壓差和進(jìn)風(fēng)、排風(fēng)的風(fēng)量?！)必須設計安裝通風(fēng)系統的自動(dòng)控制和警報裝置以確保實(shí)驗室內不出現正壓并保持各房間壓強和壓差正常。Ⅲ級生物安全柜的排風(fēng)必須直接與排風(fēng)管道相連。排風(fēng)管道必須單獨設置，不得與建筑物排風(fēng)系統相連?！)環(huán)境參數：安全柜室必須保持負壓程度最高，其相對壓強不得高于－60Pa；安全柜室、內更衣室、淋浴室和外更衣室的相對壓強依次增高，相鄰房間之間應有壓差，保持在10Pa～15 Pa之間。核心區域的空氣潔凈度以七級至八級為宜。實(shí)驗室人工照明應均勻，不眩目，照度不低于500 1x?！)進(jìn)風(fēng)為三級過(guò)濾系統，最后一級必須經(jīng)討高效過(guò)濾器過(guò)濾?！)來(lái)自整個(gè)核心區域的排風(fēng)必須連續經(jīng)過(guò)兩個(gè)高效過(guò)濾器處理。排風(fēng)口應遠離實(shí)驗室區和進(jìn)風(fēng)口。 g)進(jìn)風(fēng)和排風(fēng)高效過(guò)濾器必須安裝在實(shí)驗室各房間設在圍護結構上的風(fēng)口里，以避免污染風(fēng)管。高效過(guò)濾器風(fēng)口結構必須在更換高效過(guò)濾器之前實(shí)現就地消毒?；虿捎每稍跉饷艽羞M(jìn)行更換的過(guò)濾器結構，以后再對高效過(guò)濾器進(jìn)行消毒或焚燒。每臺高效過(guò)濾器安裝前后都必須進(jìn)行檢測，運行后每年也必須進(jìn)行一次檢測。 6.4.2.5 安全裝置及特殊設備 a)安全柜室必須設置Ⅲ級生物安全柜?！)高壓滅菌鍋的門(mén)必須自動(dòng)控制，只有在滅菌循環(huán)完成后，其外門(mén)方可開(kāi)啟?！）必須提供雙開(kāi)門(mén)的液體浸泡槽、熏蒸消毒室或用于消毒的通風(fēng)氣閘室，對來(lái)自Ⅲ級生物安全柜和安全柜室的不能高壓消毒的物品進(jìn)行消毒，使其安全進(jìn)出?！)如果有中央真空管線(xiàn)系統，不應在安全柜室以外的空間使用。在線(xiàn)的高效過(guò)濾器盡可能接近每個(gè)使用點(diǎn)或截門(mén)處。濾器應易于現場(chǎng)消毒或更換。其他通往安全柜室的氣、液管線(xiàn)要求安裝保護裝置以防止回流?！)自?xún)雀率?含衛生間)，安全柜室水池下水、地漏以及高壓消毒室和其他來(lái)源流出的液體在排往下水道之前，必需經(jīng)過(guò)消毒，最好用加熱消毒法。地漏必須有充滿(mǎn)對被實(shí)驗傳染性物質(zhì)有效的化學(xué)消毒劑的水封，它們直接通往消毒系統。下水道口和其他服務(wù)管線(xiàn)均應安裝高效過(guò)濾器。自淋浴室和外更衣室、廁所排出的液體可以不經(jīng)過(guò)任何處理直接排到下水道中。對液體廢棄物的消毒效果必須經(jīng)過(guò)證實(shí)。 f)必須為實(shí)驗室的核心區(安全柜室、內更衣室、淋浴室和外更衣室)的通風(fēng)系統、警報器、照明、進(jìn)出控制和生物安全柜設置可以自動(dòng)啟動(dòng)的緊急電源。 6.4.2.6 其他 a)工作臺表面應無(wú)縫或為密封的表面。應不透水，耐腐蝕、耐熱?！)實(shí)驗室的家具應簡(jiǎn)單，為開(kāi)放結構，且牢固。實(shí)驗臺、安全柜和其他設備之間留有空間以便能夠清理和消毒。椅子和其它設施表面應鋪上非纖維材料使之容易消毒。家具和設備的邊角和突出部位應光滑、無(wú)毛刺，以圓弧形為宜?！)在安全柜室。內外更衣室近門(mén)處安裝非手動(dòng)操作的或自動(dòng)洗手池?！)實(shí)驗室與外部必須設有通訊系統，宜設閉路電視系統。 e)實(shí)驗室內的實(shí)驗記錄等資料必須通過(guò)傳真機發(fā)送至實(shí)驗室外。 6.4.3 穿著(zhù)正壓服型實(shí)驗室設計和建造的特殊要求 6.4.3.1 選址：實(shí)驗室應建造在獨立的建筑物內或實(shí)驗室建筑物內獨立的區域。 6.4.3.2 平面布局 a)實(shí)驗室核心區域由安放有Ⅱ級生物安全柜的房間(主實(shí)驗室)和進(jìn)入通道組成。進(jìn)入通道包括更衣區和消毒區。更衣區依次為外更衣室、淋浴室和內更衣室，消毒區為化學(xué)淋浴室，工作人員離開(kāi)主實(shí)驗室時(shí)首先經(jīng)過(guò)化學(xué)淋浴消毒正壓防護服表面。核心區任何相鄰的門(mén)之間都有自動(dòng)連鎖裝置，防止兩個(gè)相鄰的門(mén)被同時(shí)打開(kāi)。對于不能從更衣室攜帶進(jìn)出主實(shí)驗室的材料、物品和器材，應在主實(shí)驗室墻上設置具有雙門(mén)結構的高壓滅菌鍋、浸泡消毒槽、熏蒸室或帶有消毒裝置的通風(fēng)傳遞窗，以便進(jìn)行傳遞或消毒。必須設置帶氣閘室的緊急出口通道?！)同本標準6.4.2.2 b)中的要求。 6.4.3.3 圍護結構：與本標準6.4.2.3中各款的要求相同。 6.4.3.4 通風(fēng)空調 a)實(shí)驗區必須保持負壓程度最高，其相對壓強不得高于－80Pa；實(shí)驗區、化學(xué)消毒淋浴室、內更衣室、淋浴室和外更衣室的相對壓強依次增高，相鄰房間之間保持10Pa～15Pa的壓差。核心區域的空氣潔凈度以七級至八級為宜?！)除上述條款外，其他與本標準6.4.2.4中各款的要求相同。 6.4.3.5 安全裝置及特殊設備 a)主實(shí)驗室必須設置至少為Ⅱ級的生物安全柜?！)進(jìn)入主實(shí)驗室的工作人員必須穿著(zhù)正壓防護服，由高效過(guò)濾器提供保護的生命支持系統供給呼吸用氣。生命支持系統包括提供超量呼吸氣體的正壓供氣裝置，報警器和緊急支援氣罐。工作服內氣壓相對周?chē)h(huán)境為持續正壓。必須為生命支持系統設置自動(dòng)啟動(dòng)的緊急電源?！)除上述條款外，其他與本標準6.4.2.5中各款的要求相同。 6.4.3.6 其他：與本標準6.4.2.6中各款的要求相同。 7 實(shí)驗脊椎動(dòng)物生物安全防護實(shí)驗室 7.1 在設計實(shí)驗脊椎動(dòng)物生物安全防護實(shí)驗室時(shí)必須同時(shí)滿(mǎn)足本標準中相應級別生物安全防護實(shí)驗室和GBl4925—2001《實(shí)驗動(dòng)物環(huán)境及設施》中的要求。 7.2 在設計實(shí)驗脊椎動(dòng)物生物安全防護實(shí)驗室時(shí)必須充分考慮動(dòng)物活動(dòng)本身產(chǎn)生的危險(如產(chǎn)生氣溶膠，撕咬抓撓對人的危害等)，并在安全操作規程、安全設備和個(gè)體防護、實(shí)驗室設計建設方面采取必要措施。 7.3 使用實(shí)驗脊椎動(dòng)物的生物安全防護實(shí)驗室必須與一般動(dòng)物繁殖設施實(shí)施物理隔離。 7.4 三級實(shí)驗脊椎動(dòng)物生物安全防護實(shí)驗室中的動(dòng)物必須置于帶有凈化通風(fēng)裝置的負壓箱籠系統內。 7.5 四級實(shí)驗脊椎動(dòng)物生物安全防護實(shí)驗室中的動(dòng)物，在安全柜型實(shí)驗室中必須置于Ⅲ級生物安全柜中；在穿著(zhù)正壓服型實(shí)驗室中，工作人員必須穿著(zhù)正壓服，動(dòng)物則必須置于帶有凈化通風(fēng)裝置的負壓箱籠系統內。 8 生物危險標志及使用 8.1 生物危險標志見(jiàn)下圖1 生物危險標志 8.2 生物危險標志的使用 8.2.1 在二級以上的生物安全防護實(shí)驗室的入口明顯位置處必須貼有生物危險標志，并標明級別。 8.2.2 所有盛裝傳染性物質(zhì)的容器表面明顯位置處必須貼有生物危險標準，并按所在生物安全防護實(shí)驗室的級別標明相同的級別。 9 新建三級和四級生物安全防護實(shí)驗室的驗收和現有生物安全防護實(shí)驗室的檢測 9.1 新建三級和四級生物安全防護實(shí)驗室的驗收和啟用。分為工程竣工驗收、專(zhuān)家組驗收和批準啟用三個(gè)階段。工程竣工驗收后，新建的三級和四級生物安全防護實(shí)驗室必須先由專(zhuān)家組進(jìn)行驗收，并提出驗收報告，然后經(jīng)有關(guān)主管部門(mén)批準后方可啟用。 9.1.1 專(zhuān)家組驗收 專(zhuān)家組驗收時(shí)必須進(jìn)行文件審查、現場(chǎng)實(shí)地驗收檢查和對工作人員的抽查考核，并提出驗收報告。 9.1.1.1 專(zhuān)家組驗收時(shí)必須審查的文件 a)立項報告和相關(guān)文件； b)實(shí)驗微生物危害評估報告； c)設計任務(wù)書(shū)、設計說(shuō)明和設計圖紙。如已納入基建項目，基建程序所要求必備的其他文件； d)可部分參照JGJ 71—1990潔凈室施工及驗收規范進(jìn)行竣工驗收和檢測報告； e)第三方檢測報告，包括各房間壓差、潔凈度、噪聲和排風(fēng)高效空氣過(guò)濾器檢漏等； f)實(shí)驗室使用和操作技術(shù)規程； g)實(shí)驗室管理制度； h)實(shí)驗微生物操作規程(每種一份)； i）緊急情況處理規程； j）工作人員(含本人簽字)登記表； k)實(shí)驗室內儀器登記表； 1)工作人員培訓記錄； m)工作人員體檢(含血清檢查)和免疫接種登記表； 以上(f～m)各項應匯總裝訂成一冊，封面標題為“生物安全手冊”。登記表和記錄部分應留有足夠空間供后續之用?！)實(shí)驗室使用登記本(工作日志)； o)緊急情況登記和處理記錄本。 9.1.1.2 實(shí)驗室工作人員抽查考核。在驗收過(guò)程中應對工作人員以口試或筆試的形式進(jìn)行抽查，抽查人數不得少于工作人員總數的四分之一。 9. 2 現用三級和四級生物安全防護實(shí)驗室和Ⅱ級生物安全柜的檢測 9.2.1 現用三級和四級生物安全防護實(shí)驗室的圍護結構、通風(fēng)系統（含更換高效過(guò)濾器）維修后，以及生物安全柜移動(dòng)或檢修后，必須進(jìn)行重新檢測（含生物安全柜）。檢測根據本標準和JGJ 71-1990的要求和設計任務(wù)書(shū)的指標進(jìn)行。 9.2.2 現用三級和四級生物安全防護實(shí)驗室啟用后每年進(jìn)行一次年度檢測. 9.2.3 各級生物安全防護實(shí)驗室中使用的Ⅱ級生物安全柜必須每年進(jìn)行一次年度現場(chǎng)檢測(見(jiàn)附錄B)。 10 現用三級和四級生物安全防護實(shí)驗室的使用和維護 10.1 現用三級和四級生物安全防護實(shí)驗室的使用和維護必須按本標準和實(shí)驗室生物安全手冊的要求進(jìn)行。 10.2 對已通過(guò)驗收的實(shí)驗室中與生物安全有關(guān)的設施和設備不能擅自進(jìn)行改動(dòng)。 10.3 如確需變更實(shí)驗室的結構和設備，必須經(jīng)有關(guān)專(zhuān)家論證和主管部門(mén)批準。 10.4 實(shí)驗室應由專(zhuān)業(yè)人員在保證安全的條件下進(jìn)行應急和定期檢修與保養。附錄A （規范性附錄）安全操作規程 A.1 一級生物安全防護實(shí)驗室 A.1.1 常規微生物操作規程中的安全操作要點(diǎn) A.1.1.1 禁止非工作人員進(jìn)入實(shí)驗室。參觀(guān)實(shí)驗室等特殊情況須經(jīng)實(shí)驗室負責人批準后方可進(jìn)入。 A.1.1.2 接觸微生物或含有微生物的物品后，脫掉手套后和離開(kāi)實(shí)驗室前要洗手。 A.1.1.3 禁止在工作區飲食、吸煙、處理隱形眼鏡、化妝及儲存食物。 A.1.1.4 以移液器吸取液體，禁止口吸。 A.1.1.5 制定尖銳器具的安全操作規程。 A.1.1.6 按照實(shí)驗室安全規程操作，降低濺出和氣溶膠的產(chǎn)生。 A.1.1.7 每天至少消毒一次工作臺面，活性物質(zhì)濺出后要隨時(shí)消毒。 A.1.1.8 所有培養物、廢棄物在運出實(shí)驗室之前必須進(jìn)行滅活，如高壓滅活。需運出實(shí)驗室滅活的物品必須放在專(zhuān)用密閉容器內。 A.1.1.9 制定有效的防鼠防蟲(chóng)措施。 A.1.2 特殊的安全操作規程 無(wú)特殊的安全操作規程。 A.2 二級生物安全防護實(shí)驗室 A.2.1 常規微生物操作規程中的安全操作要點(diǎn) A.2.1.1 與本附錄A.1.1～A.1.9相同。 A.2.1.2 實(shí)驗室入口處須貼上生物危險標志,內部顯著(zhù)位置須貼上有關(guān)的生物危險信息,包括使用傳染性材料的名稱(chēng),負責人姓名和電話(huà)號碼。 A.2.2 特殊的安全操作規程 A.2.2.1 進(jìn)行感染性實(shí)驗時(shí)，禁止他人進(jìn)入實(shí)驗室，或必須經(jīng)實(shí)驗室負責人同意后方可進(jìn)入。免疫耐受或正在使用免疫抑制劑的工作人員必須經(jīng)實(shí)驗室負責人同意方可在實(shí)驗室或動(dòng)物房?jì)裙ぷ鳌?br /> A.2.2.2 實(shí)驗室入口處須貼上生物危險標志，注明危險因子、生物安全級別、需要的免疫、負責人姓名和電話(huà)、進(jìn)入實(shí)驗室的特殊要求及離開(kāi)實(shí)驗室的程序。 A.2.2.3 工作人員應接受必要的免疫接種和檢測(如乙型肝炎疫苗、卡介苗等)。 A.2.2.4 必要時(shí)收集從事危險性工作人員的基本血清留底，并根據需要定期收集血清樣本，應有檢測報告，如有問(wèn)題及時(shí)處理。 A.2.2.5 將生物安全程序納入標準操作規范或生物安全手冊，由實(shí)驗室負責人專(zhuān)門(mén)保管，工作人員在進(jìn)入實(shí)驗室之前要閱讀規范并按照規范要求操作。 A.2.2.6 工作人員要接受有關(guān)的潛在危險知識的培訓，掌握預防暴露以及暴露后的處理程序。每年要接受一次最新的培訓。 A.2.2.7 嚴格遵守下列規定，防止利器損傷： A.2.2.7.1 除特殊情況(腸道外注射和靜脈切開(kāi)等)外，禁止在實(shí)驗室使用針、注射器及其他利器。盡可能使用塑料器材代替玻璃器材。 A.2.2.7.2 盡可能應用一次性注射器，用過(guò)的針頭禁止折彎、剪斷、折斷、重新蓋帽、從注射器取下，禁止用手直接操作。用過(guò)的針頭必須直接放人防穿透的容器中。非一次性利器必須放入厚壁容器中并運送到特定區域消毒，最好進(jìn)行高壓消毒。 A.2.2.7.3 盡可能使用無(wú)針注射器和其他安全裝置。 A.2.2.7.4 禁止用手處理破碎的玻璃器具。裝有污染針、利器及破碎玻璃的容器在丟棄之前必須消毒。 A.2.2.8 培養基、組織、體液及其他具有潛在危險性的廢棄物須放在防漏的容器中儲存、運輸及消毒滅菌。 A.2.2.9 實(shí)驗設備在運出修理或維護前必須進(jìn)行消毒。 A.2.2.10 人員暴露于感染性物質(zhì)時(shí)，及時(shí)向實(shí)驗室負責人匯報，并記錄事故經(jīng)過(guò)和處理方案。 A.2.2.11 禁止將無(wú)關(guān)動(dòng)物帶入實(shí)驗室。 A.3 三級生物安全防護實(shí)驗室 A.3.1 常規微生物操作規程中的安全操作要點(diǎn) 與本附錄A.2.1的要求相同。 A.3.2 特殊的安全操作規程 A.3.2.1 實(shí)驗室的門(mén)必須關(guān)上。 A.3.2.2 進(jìn)入實(shí)驗室的工作人員必須經(jīng)實(shí)驗室負責人同意，禁止干擾正在操作或輔助的工作人員。禁止免疫耐受和正在使用免疫抑制劑的工作人員進(jìn)入實(shí)驗室；禁止臨時(shí)有病或有皮膚破損者在實(shí)驗室工作；禁止未成年人進(jìn)入實(shí)驗室。 A.3.2.3 實(shí)驗室入口處必須貼上生物危險標志，注明危險因子、生物安全級別、需要的免疫、實(shí)驗室負責人或其他相關(guān)負責人姓名和電話(huà)、進(jìn)入實(shí)驗室的特殊要求及離開(kāi)實(shí)驗室的程序。 A.3.2.4 建立嚴格的實(shí)驗室規章制度，有關(guān)人員進(jìn)入實(shí)驗室時(shí)必須明確進(jìn)入和離開(kāi)實(shí)驗室的程序。建立出入登記冊制度。 A.3.2.5 工作人員應接受必要的免疫接種和檢測(如乙肝疫苗、卡介苗)，并定期進(jìn)行檢查。 A.3.2.6 收集工作人員和其它風(fēng)險人群的基本血清留底，以后根據需要定期收集血清樣本，應有檢測報告，如有問(wèn)題及時(shí)處理。 A.3.2.7 將生物安全程序納入實(shí)驗室標準操作規范或生物安全手冊，向所有工作人員提供生物安全手冊。告知工作人員實(shí)驗室的特殊危險，工作人員要閱讀并按照規范的要求操作。 A.3.2.8 實(shí)驗室及其輔助工作人員要接受有關(guān)的潛在危險知識的培訓，掌握預防暴露以及暴露后的處理程序。每年要接受最新的培訓。 A.3.2.9 在進(jìn)入實(shí)驗室之前，實(shí)驗室負責人有責任向所有工作人員提供標準微生物學(xué)操作規范和技術(shù)，儀器操作規范。并由專(zhuān)家提供特殊培訓。 A.3.2.10 實(shí)驗所需物品必須經(jīng)傳遞窗送入。 A.3.2.11 嚴格遵守下列規定，防止利器損傷： A.3.2.11.1 除腸道外注射和靜脈切開(kāi)等特殊情況，嚴禁在實(shí)驗室使用針、注射器及其他利器。盡可能用塑料器材取代玻璃器材。 A.3.2.11.2 注射和吸取感染性液體時(shí)必須用一次性注射器，用過(guò)的針頭禁止折彎、折斷、剪斷、重新蓋上帽、從注射器取下，禁止用手直接操作。應將其放在不銹鋼容器中。非一次性利器必須放到厚壁容器中，運到特定區域消毒，最終進(jìn)行高壓消毒。 A.3.2.11.3 盡可能使用無(wú)針注射器和其他安全裝置，裝有污染的針、利器及破碎玻璃的容器在丟棄之前必須進(jìn)行高壓滅菌。禁止用手處理破碎的玻璃器具。 A.3.2.12 禁止在開(kāi)放的實(shí)驗臺上和容器內進(jìn)行感染性物質(zhì)的操作，應在生物安全柜或其他物理設備中進(jìn)行。生物安全柜內的工作臺表面用適當的消毒劑清理。 A.3.2.13 培養基、組織、體液及其他廢棄物必須放在防漏的容器中儲存及運輸。 A.3.2.14 感染性實(shí)驗結束后，尤其在感染性物質(zhì)溢出和濺出后，應由專(zhuān)業(yè)人員或經(jīng)過(guò)正規培訓的人員進(jìn)行消毒和清理。實(shí)驗室中必須備有溢出物處理程序的文件。 A.3.2.15 污染的設備在運出維修前必須消毒。所有廢棄物或物品，在丟棄或重新使用前必須消毒。 A.3.2.16 建立實(shí)驗室事故和暴露的報告系統。感染性物質(zhì)溢出及暴露事故發(fā)生后，必須及時(shí)消毒處理，并向實(shí)驗室負責人匯報，并記錄事故過(guò)程和處理經(jīng)過(guò)。 A.3.2.17 禁止將無(wú)關(guān)動(dòng)植物帶入實(shí)驗室。 A.4 四級生物安全防護實(shí)驗室 A.4.1 常規微生物操作規程中的安全操作要點(diǎn) A.4.1.1 實(shí)驗過(guò)程中非實(shí)驗人員進(jìn)入實(shí)驗室須經(jīng)實(shí)驗室負責人批準。 A.4.1.2 制定尖銳器具的安全操作規程。 A.4.1.3 必須嚴格執行所有操作程序，減少或避免氣溶膠的產(chǎn)生。 A.4.1.4 每次實(shí)驗結束后，必須消毒工作臺面，活性物質(zhì)濺出及溢出后必須及時(shí)處理和消毒。 A.4.1.5 所有的廢棄物在丟棄之前用適當的方法消毒，如高壓消毒。 A.4.1.6 制定有效的防鼠、防蟲(chóng)措施。 A.4.2 特殊的安全操作規程 A.4.2.1 禁止非工作人員、免疫耐受和免疫抑制的人員、兒童及孕婦進(jìn)入實(shí)驗室。臨時(shí)有病(如上呼吸道感染等)的工作人員也禁止進(jìn)入實(shí)驗室。 A.4.2.2 實(shí)驗室入口安裝帶鎖的安全門(mén)，進(jìn)入實(shí)驗室由實(shí)驗室負責人，生物安全負責人或設備安全負責人管理。進(jìn)入實(shí)驗室之前，工作人員必須了解實(shí)驗室的潛在危險及正確的防護措施。 A.4.2.3 進(jìn)入實(shí)驗室的人員必須遵守進(jìn)入和離開(kāi)實(shí)驗室的程序，記錄進(jìn)入和離開(kāi)實(shí)驗室的日期、時(shí)間及實(shí)驗室狀態(tài)。 A.4.2.4 建立有效的應急處理方法。 A.4.2.5 實(shí)驗室入口處必須貼上生物危險標志，注明危險因子，實(shí)驗室負責人姓名和進(jìn)入實(shí)驗室所需的特殊要求(如免疫和防毒面具等)。 A.4.2.6 實(shí)驗室負責人保證工作人員熟知標準微生物和本實(shí)驗室所研究微生物的操作規范和技術(shù)，掌握實(shí)驗室設備的特殊規范和操作。 A.4.2.7 工作人員應接受有關(guān)致病因子的免疫接種。 A.4.2.8 收集檢測工作人員的本底血清并留底，以后根據需要定期收集血清樣本。建立血清學(xué)監測程序。 A.4.2.9 向工作人員提供生物安全手冊，告知有關(guān)的特殊危險，要求其閱讀并嚴格按照規范操作。 A.4.2.10 工作人員須接受有關(guān)的潛在危險知識培訓、掌握預防暴露及暴露后的處理程序。定期接受最新的培訓。 A.4.2.11 進(jìn)入和離開(kāi)實(shí)驗室只能通過(guò)更衣室和淋浴室通道。只有在緊急情況下才可經(jīng)氣閘門(mén)應急通道離開(kāi)實(shí)驗室。 A.4.2.12 工作人員在外更衣室更換存放自己的衣服，進(jìn)入實(shí)驗室須在內更衣室潔凈工作服間穿戴整套實(shí)驗室工作服，包括內衣、褲子、襯衫、鞋、手套等。離開(kāi)實(shí)驗室必須淋浴，進(jìn)入淋浴室前，在內更衣室非潔凈工作服間脫掉衣服，衣服經(jīng)高壓消毒后清洗。 A.4.2.13 實(shí)驗室所需物品經(jīng)雙門(mén)高壓室，煙熏消毒室或氣閘門(mén)送入。 A.4.2.14 嚴格遵守下列規定，防止利器損傷： A.4.2.14.1 除腸道外注射等特殊情況，嚴禁在實(shí)驗室使用針、注射器或其他利器。盡可能用塑料器材取代玻璃器材。 A.4.2.14.2 注射和抽取感染性液體時(shí)必須用一次性聯(lián)體注射器，用過(guò)的針頭禁止折彎、剪斷、折斷、重新蓋上帽、從注射器取下，用手工操作。將針?lè )旁诜来┩溉萜髦?，非一次性利器放入厚壁容器內運到特定區進(jìn)行高壓消毒。 A.4.2.14.3 盡可能使用無(wú)針注射器和其他安全裝置。 A.4.2.14.4 禁止用手處理破碎的玻璃器具、裝有污染的針，利器及破碎玻璃的容器在丟棄之前必須高壓消毒。 A.4.2.15 從三級生物安全柜或四級生物安全實(shí)驗室轉移的生物學(xué)物質(zhì)必須完整地轉到不易破裂的密封一級容器內，再用二級容器包裝，通過(guò)消毒液池和氣閘門(mén)運出實(shí)驗室。 A.4.2.16 除生物學(xué)物質(zhì)須保持完整原始狀態(tài)外，禁止從四級生物安全實(shí)驗室取出沒(méi)有經(jīng)過(guò)高壓消毒或煙熏消毒的物質(zhì)。 A.4.2.17 感染性物質(zhì)實(shí)驗結束后，尤其在感染性物質(zhì)溢出和濺出后，由專(zhuān)業(yè)人員或經(jīng)過(guò)正規培訓的人員進(jìn)行消毒。儀器在運出修理和保養前要進(jìn)行消毒。實(shí)驗室中必須備有溢出物處理程序的文件。 A.4.2.18 建立實(shí)驗室事故和暴露的報告系統，感染性物質(zhì)溢出及暴露事故發(fā)生后，必須及時(shí)向實(shí)驗室負責人匯報，并記錄事故過(guò)程和處理經(jīng)過(guò)。建立實(shí)驗室感染人員的隔離和醫療護理機構。 A.4.2.19 禁止在實(shí)驗室處理無(wú)關(guān)物品。附錄B （規范性附錄） II級生物安全柜的現場(chǎng)檢測 B.1 有下列情況之一時(shí)，必須對Ⅱ級生物安全柜進(jìn)行現場(chǎng)檢測 B.1.1 實(shí)驗室施工時(shí)，Ⅱ級生物安全柜搬放到指定位置后。 B.1.2 Ⅱ級生物安全柜被移動(dòng)位置后。 B.1.3 對Ⅱ級生物安全柜進(jìn)行檢修后。 B.1.4 Ⅱ級生物安全柜更換高效過(guò)濾器后。 B.1.5 Ⅱ級生物安全柜一年一度的常規現場(chǎng)檢測。 B.2 現場(chǎng)檢測的必測項目和方法 B.2.1 垂直氣流速度斷面測定 B.2.1.1 儀器：準確度為讀數±3％的熱風(fēng)速計。 B.2.1.2 方法：測點(diǎn)位于柜內送風(fēng)口下方0.15m處，為均勻測點(diǎn)。測點(diǎn)間距不大于0.15m。測點(diǎn)布置不少于三行，靠?jì)缺诘男芯喙駜缺?.15 m，每行不少于7個(gè)測點(diǎn)。 B.2.1.3 判定：垂直氣流均勻區所測平均風(fēng)速與生產(chǎn)廠(chǎng)給定值之差小于±0.025 m／s，且單點(diǎn)風(fēng)速與所測平均風(fēng)速之差不大于20％為合格。 B.2.2 工作窗口進(jìn)風(fēng)風(fēng)速測定 B.2.2.1 方法 首先測定工作窗口進(jìn)風(fēng)風(fēng)量，再除以生物安全柜工作窗口面積計算出進(jìn)風(fēng)風(fēng)速?！」ぷ鞔翱谶M(jìn)風(fēng)風(fēng)量通過(guò)測定生物安全柜的排風(fēng)風(fēng)量而求出。對于僅從工作窗口進(jìn)風(fēng)的生物安全柜，生物安全柜的排風(fēng)風(fēng)量就等于工作窗口進(jìn)風(fēng)風(fēng)量；對于除從工作窗口進(jìn)風(fēng)外，還有單獨的進(jìn)風(fēng)管的生物安全柜，則從排風(fēng)管的總排風(fēng)量扣除進(jìn)風(fēng)管進(jìn)風(fēng)風(fēng)量即為工作窗口進(jìn)風(fēng)風(fēng)量。采用JGJ 7l—1990中所規定方法測定生物安全柜的(進(jìn))排風(fēng)管風(fēng)量。 B.2.2.2 判定：所測進(jìn)風(fēng)風(fēng)速與生產(chǎn)廠(chǎng)給定值之差小于±0.025 m／s為合格。 B.2.3 煙霧試驗：使用發(fā)煙物作直觀(guān)判斷。 B.2.3.1 在工作表面中線(xiàn)上方高于工作窗口上沿0.15 m處從側板一端到另一端發(fā)煙，應為垂直流線(xiàn)，不得有死角和回流。 B.2.3.2 距觀(guān)察窗內表面0.025m，高于工作窗口上沿0.15m處從一端到另一端發(fā)煙，應為垂直流線(xiàn)，不得有死角和回流，也無(wú)煙霧從安全柜逸出。 B.2.3.3 距工作窗口0.04m沿窗口外邊沿發(fā)煙，吸入的煙無(wú)逸出，工作表面無(wú)煙霧。 B.2.3.4 如為推拉式工作窗口，發(fā)煙檢查邊沿密封情況。 B.2.4 高效空氣過(guò)濾器檢漏試驗采用JGJ 7l—1990中所規定方法確認生物安全柜中的高效空氣過(guò)濾器無(wú)泄漏。 B.3 安全柜泄漏試驗(非必測項目) 試驗前使生物安全柜處于全關(guān)閉狀態(tài)，即將風(fēng)管和工作窗口密封(可用密封膠帶密封)。斷電時(shí)對生物安全柜內部充氣加壓至500Pa后停止加壓，觀(guān)察壓力保持情況。30min后壓力下降小于10％為合格。 B.4 檢測時(shí)應做漏電、接地電阻和電極性試驗?？砂从脩?hù)要求做照明測定、振動(dòng)測定和噪聲水平測定。 B.5 在頒布實(shí)施我國Ⅱ級生物安全柜有關(guān)標準之前，進(jìn)口的Ⅱ級生物安全柜必須符合生產(chǎn)國相應的標準，生產(chǎn)國無(wú)相關(guān)標準的產(chǎn)品不得進(jìn)口使用。國產(chǎn)的Ⅱ級生物安全柜生產(chǎn)廠(chǎng)家必須制定相應的企業(yè)標準，其性能指標不得低于國外同類(lèi)產(chǎn)品的標準。出廠(chǎng)時(shí)必須按企業(yè)標準對每臺生物安全柜進(jìn)行檢測并出具檢測報告，使用微生物進(jìn)行的生物安全防護檢測不得省略。附錄C （資料性附錄）各國的微生物與生物安全防護實(shí)驗室適用級別表 C.1 本附錄中各國(組織)有關(guān)微生物風(fēng)險組和生物安全防護水平的定義 C.1.1 歐盟(EU—96，1993年10月) C.1.1.1 1類(lèi)風(fēng)險組指不可能造成人類(lèi)疾病的微生物。 C.1.1.2 2類(lèi)風(fēng)險組指微生物能夠造成人類(lèi)疾病，并可能對工作人員有危害，但不能傳播到社區中去，且通常有有效的預防和處理措施。 C.1.1.3 3類(lèi)風(fēng)險組指微生物能夠造成人類(lèi)疾病，對工作人員有嚴重的危害，它有向社區傳播的風(fēng)險，但通常有有效的預防和治療措施。 C.1.1.4 4類(lèi)風(fēng)險組指微生物可以造成嚴重的人類(lèi)疾病，對工作人員有嚴重的危害，有很高的向社區傳播的風(fēng)險，通常沒(méi)有有效的預防和治療措施。 C.1.2 美國國立衛生研究院(NIH)關(guān)于重組DNA的條例(NIHrDNA—97) C.1.2.1 1類(lèi)風(fēng)險組(RGl)微生物與健康成年人疾病無(wú)關(guān)。 C.1.2.2 2類(lèi)風(fēng)險組(RG2)微生物與人類(lèi)疾病有關(guān)，但不嚴重，有可以預防和治療的干預措施。 C.1.2.3 3類(lèi)風(fēng)險組(RG3)微生物與嚴重的或致死性人類(lèi)疾病相關(guān)，但可能有用于預防或治療的干預措施。 C.1.2.4 4類(lèi)風(fēng)險組(RG4)微生物可能造成嚴重的或致死性的人類(lèi)疾病，但通常沒(méi)有預防和治療的干預措施。 C.1.3 加拿大實(shí)驗室生物安全條例(LCDC96，第二版，1996) C.1.3.1 1類(lèi)風(fēng)險組(對個(gè)人和社區低風(fēng)險)包括那些不可能對健康人或動(dòng)物造成疾病的微生物，如細菌、真菌、病毒和寄生蟲(chóng)。 C.1.3.2 2類(lèi)風(fēng)險組(中等的個(gè)人風(fēng)險、有限的社區風(fēng)險)致病原可以造成人類(lèi)或動(dòng)物疾病，在一般情況下，不太可能對健康的實(shí)驗室工作人員、社區、家畜或環(huán)境構成嚴重危害，實(shí)驗室暴露很少會(huì )有導致嚴重疾病的感染，并有有效的預防和治療措施，傳播的風(fēng)險有限。 C.1.3.3 3類(lèi)風(fēng)險組(高個(gè)人風(fēng)險、低社區風(fēng)險)致病原可以造成嚴重的人類(lèi)或動(dòng)物疾病，或可以造成嚴重的經(jīng)濟后果，但個(gè)人之間的偶然接觸不會(huì )造成病原傳播，或可以用抗微生物或寄生蟲(chóng)的藥物治療。 C.1.3.4 4類(lèi)風(fēng)險組(高個(gè)人風(fēng)險、高社區風(fēng)險)致病原通?？梢栽斐蓢乐氐娜诵蠹膊?，經(jīng)常是不可治愈的，易于在人與人之間、人畜之間通過(guò)直接、間接或偶然接觸傳播。 C.1.4 美國CDC／NIH微生物和生物醫學(xué)實(shí)驗室生物安全(BMBL93—CDC第3版，1993) C.1.4.1 1級生物安全防護水平適合與具有明顯特征的微生物相關(guān)的工作，不會(huì )對健康成人造成疾病，對實(shí)驗室工作人員和環(huán)境有很小的潛在危害。 C.1.4.2 2級生物安全防護水平適合用于微生物對個(gè)人和環(huán)境有中等程度潛在危害的工作。 C.1.4.3 3級生物安全防護水平適用于臨床、診斷、教學(xué)、科研及生產(chǎn)工作中，用于處理通過(guò)吸入途徑暴露時(shí)可以造成嚴重或潛在致死性疾病的內地或外來(lái)的微生物。 C.1.4.4 4級生物安全防護水平適用于處理高度危險微生物工作，該微生物具有很高的個(gè)人風(fēng)險，可通過(guò)氣溶膠傳播造成實(shí)驗室感染和威脅生命的疾病?！∽ⅲ嚎蓞⒖济绹膊】刂浦行模绹鴩⑿l生研究院(CDC／NIH)微生物和生物醫學(xué)實(shí)驗室生物安全第四版中的新定義。 C.2 各國微生物與生物安全實(shí)驗室適用級別表（略）見(jiàn)表C.1~ 表C.4。表C.1~ 表C.4引自美國生物安全協(xié)會(huì )（ABSA，American Biological Safety Association）公開(kāi)發(fā)表的資料。 |
