美國疾病控制中心實(shí)驗室生物安全級別標準 公司新聞新聞動(dòng)態(tài) > 首頁(yè) >
本標準概括了傳染性微生物學(xué)和實(shí)驗室動(dòng)物工作中的四個(gè)生物安全級別所包括的主要因素，根據給個(gè)人、社會(huì )、提供的保護情況，確定級別。
生物安全一級（BSL—1）
BSL—1適合于非常熟悉的病源，該病源不會(huì )經(jīng)常引發(fā)健康成人疾病，對實(shí)驗室人員和環(huán)境潛在危險小。實(shí)驗室沒(méi)有必要和建筑物中的一般行走區分開(kāi)，一般按照標準的微生物操作，在開(kāi)放的實(shí)驗臺上開(kāi)展工作。不要求、一般也不使用特殊的遏制設備和設施。實(shí)驗人員在實(shí)驗程序方面受過(guò)特殊訓練，由受過(guò)微生物學(xué)或相關(guān)科學(xué)一般訓練的科學(xué)工作者監督實(shí)驗。
以下標準及特殊操作、安全設備及設施和BSL-1病源有關(guān)：
一、 標準微生物操作：
1、 在進(jìn)行有關(guān)培養物及樣品實(shí)驗時(shí)，未經(jīng)實(shí)驗室主任同意，限制或禁止進(jìn)入實(shí)驗室。
2、 進(jìn)行活體處理后，實(shí)驗人員要洗手；離開(kāi)實(shí)驗室前脫手套。
3、 不許在工作區域飲食、吸煙、清洗隱形眼鏡和化妝。不允許在工作區存放食物和日常生活用品。在實(shí)驗室中，戴隱型眼鏡的人，也需要戴口罩。食物存放在工作區域以外專(zhuān)用櫥柜或冰箱中。
4、 不能用嘴移液，只能用機械裝置移液。
5、 制定銳器安全使用規范。
6、 所有的操作過(guò)程應盡量細心，避免產(chǎn)生濺出和氣溶膠。
7、 至少一天一次、活體濺出時(shí)，都應進(jìn)行臺面消毒。
8、 所有的培養物、儲存物及其它規定的廢物在釋放前，均應使用可行的消毒方法進(jìn)行消毒，如高壓滅菌。轉移到就近實(shí)驗室消毒的物料應置于耐用、防漏容器內，密封運出實(shí)驗室，其包裝應符合有關(guān)地方、州、聯(lián)邦法規。
9、 當存在傳染源時(shí)，應在實(shí)驗室入口處貼生物危險標志，并顯示以下信息：實(shí)驗中的病源名稱(chēng)、研究者姓名及電話(huà)號碼。
10、齲齒動(dòng)物的程序（參見(jiàn)附錄G）（另發(fā)）
二、 特殊操作：無(wú)
三、 安全設備（第一道屏障）
1、 和BSL-1相關(guān)的病源，其操作一般不需要生物安全之類(lèi)的特殊遏制裝置或設備。
2、 建議穿實(shí)驗服、大褂、制服，避免污染和衣服上的塵土。
3、 若手上皮膚有傷或皮疹，應戴手套。
4、 操作過(guò)程中，估計會(huì )出現微生物或危險物濺出時(shí)，應戴保護眼具。
四、 實(shí)驗室設施（第二道屏障）
1、 實(shí)驗室應設置門(mén)以控制進(jìn)入。
2、 每個(gè)實(shí)驗室有一個(gè)洗手池。
3、 實(shí)驗室設計要便于清洗，實(shí)驗室內不適宜用地毯。
4、 實(shí)驗臺表面應能防水、耐熱、耐有機溶劑、耐堿和耐用于工作臺面及設施消毒的其他化學(xué)物質(zhì)。
5、 實(shí)驗室的實(shí)驗臺應能承受預期的重量并符合使用。實(shí)驗臺、安全柜及設備間的空間應便于打掃。
6、 如果實(shí)驗室有對著(zhù)外面的窗子，應裝防止蒼蠅的窗紗。
生物安全二級（BSL-2）
BSL-2與BSL-1類(lèi)似，適合于對人和環(huán)境有中度潛在危險的病源，與BSL-1的區別在于：（1）實(shí)驗人員均接受過(guò)病源處理方面的特殊培訓，并由有資格的科學(xué)工作者指導；（2）進(jìn)行實(shí)驗時(shí)，限制進(jìn)入實(shí)驗室；（3）對于污染的銳器，要特別注意；（4）某些可能產(chǎn)生傳染性氣溶膠或飛濺物的過(guò)程。應在生物安全柜中或其它物理遏制設備中進(jìn)行。
以下的標準及特殊操作、安全設備及設施和BSL-2病源有關(guān)：
一、 標準微生物操作：
1、 實(shí)驗時(shí)，未經(jīng)實(shí)驗室主任同意，限制禁止進(jìn)入實(shí)驗室。
2、 進(jìn)行活體處理后，實(shí)驗人員要洗手；離開(kāi)實(shí)驗室前脫手套。
3、 不許在工作區域飲食、吸煙、清洗隱型眼境和化妝。食物應存放在工作區域以外專(zhuān)用櫥柜或冰箱中。
4、 不能用嘴移液，只能用機械裝置移液。
5、 制定銳器安全使用規范。
6、 所有的操作過(guò)程應盡量細心，避免產(chǎn)生濺出和氣溶膠。
7、 實(shí)驗完畢、下班前、活體濺出或溢出時(shí)，都應使用對病源有效的消毒劑進(jìn)行臺面消毒。
8、 所有的培養物、儲存物及其它規定的廢物在釋放前，均應使用可行的消毒方法進(jìn)行消毒，如高壓滅菌。轉移到就近實(shí)驗室消毒的物料應置于耐用、防漏容器內，密封運出實(shí)驗室/離開(kāi)該系統進(jìn)行消毒的物料，在轉移前應包裝，其包裝應符合有關(guān)地方、州、聯(lián)邦法規。
9、 實(shí)施控制昆蟲(chóng)和齲齒動(dòng)物的程序（參加附錄G）（另發(fā)）
二、 特殊操作：
1、 在開(kāi)展有關(guān)傳染病源工作時(shí)，實(shí)驗室主任應禁止或限制人員進(jìn)入實(shí)驗室。一般情況下，易感染人員或感染后會(huì )出現嚴重后果的人員，不允許進(jìn)入實(shí)驗室或動(dòng)物房，例如，患有免疫缺陷或免疫抑制的人，其被感染的危險性增加，實(shí)驗室主任對每種情況的估計和決定誰(shuí)能進(jìn)入實(shí)驗室或動(dòng)物房工作，負有最終責任。
2、 實(shí)驗室主任應制定規章和程序，只有告知潛在風(fēng)險并符合進(jìn)入實(shí)驗室特殊要求（如，經(jīng)過(guò)免疫接種）的人，才能進(jìn)入實(shí)驗室。
3、 存在外源性病源時(shí)，實(shí)驗室入口處應貼有生物危險標志，并顯示以下信息：有關(guān)病源、生物安全級別、免疫接種要求、研究人員姓名、電話(huà)號碼、在實(shí)驗室中必須佩帶的個(gè)人防護設施、出實(shí)驗室所要求的程序。
4、 實(shí)驗室人員接受適當的、和實(shí)驗室中處理或將要處理的病源有關(guān)的免疫接種或測試（如，乙肝免疫接種或TB皮試）
5、 根據所處理的病源，適當時(shí)，收集和儲存適合于實(shí)驗室人員和有風(fēng)險人員使用的基本血清樣品。根據所處理病源或設施的功能，應定期收集其它血清樣品。
6、 實(shí)驗室主任為實(shí)驗室人員特別制定的標準操作程序或生物安全手冊中，應包括生物安全程序。對于有特殊風(fēng)險的人員，要求閱讀并在工作及程序上遵照執行。
7、 實(shí)驗室主任保證實(shí)驗及其輔助人員接受適當的培訓，包括和工作有關(guān)的可能存在的風(fēng)險、防止暴露的必要措施和暴露評估程序。當程序必需改變時(shí)，有關(guān)人員必須每年更新知識，接受附加培訓。
8、 對于污染的銳器，必須時(shí)刻保持高度的警惕，包括針、注射器、玻片、加樣器、毛細管、手術(shù)刀。
a、 針和注射器或其它銳器應限制在實(shí)驗室內，類(lèi)似灌腸、靜脈切開(kāi)放血、或實(shí)驗室動(dòng)物液體吸出等，可以用其它器具的，就不用銳器?？赡軙r(shí)，用朔料器具代替玻璃器具。
b、 注射和吸取感染材料時(shí)，只能使用針頭固定注射器或一次性注射器（即注射器和針頭是一體的）。用過(guò)的一次性針頭必須彎曲、切斷、破碎、重新套上針頭套、從一次性注射器上去掉，或在丟棄前進(jìn)行人工處理，要不將不小心放開(kāi)入不會(huì )被刺穿的、用于收集廢棄銳器的容器中。非一次性銳器必須放置在堅壁容器中，移至處理區消毒，最好高壓殺菌。
c、 適當時(shí)，使用帶針頭套的注射器、無(wú)針頭的系統和其它安全設施。
d、 打碎的玻璃器皿不能直接用手處理，必須用其它工具處理，如刷子和簸箕、夾子或鑷子。盛污染的針頭、銳器、碎玻璃的容器在倒掉前，應按照地方、州、聯(lián)邦的規定進(jìn)行消毒。
9、 培養物、組織，體液標本，或具有潛在傳染性的廢物要放入帶蓋的容器中，以防在收集、處理、儲存、運輸或裝卸過(guò)程中泄露。
10、 按日常程序、在有關(guān)傳染源的工作結束后、尤其是傳染源濺出或灑出后、或受到其他傳染污染后，實(shí)驗室設備和工作臺面應當使用有效的消毒劑消毒。污染的設備在送去修理、維護前，要按照地方、州或聯(lián)邦的規定消毒；在離開(kāi)設施轉移前，要按照地方、州或聯(lián)邦的規定打包運輸。
11、 濺出或偶然事件中，明顯暴露于傳染源時(shí)，要立即向實(shí)驗室主任報告，進(jìn)行適當的醫學(xué)評估、觀(guān)察、治療，保留書(shū)面記錄，
12、 和實(shí)驗室無(wú)關(guān)的動(dòng)物不允許進(jìn)入實(shí)驗室。
三、 安全設備（第一道屏障）
1、 任何時(shí)候都要使用正確保養的生物安全柜、最好是二級生物安全柜、或其它合適的人員防護設施、從物理遏制裝置。
a、 確定可能形成傳染性氣溶膠或濺出物的實(shí)驗過(guò)程，包括離心、研磨、勻槳、劇烈震蕩或混勻、超聲波破裂、開(kāi)啟裝有傳染源的容器（容器內部的壓力可能與大氣壓不一致）、動(dòng)物鼻孔接種、從動(dòng)物或胚胎卵采集感染組織。
b、 涉及高濃度或大體積的傳染源時(shí)，若選用密封轉頭或帶有安全罩的離心機，若轉頭或安全罩僅在生物安全柜中打開(kāi)，則可在開(kāi)放實(shí)驗室內離心。
2、 當必須在生物安全柜外處理微生物時(shí)，需采取面部保護措施（跟鏡、口罩、面罩、或其它防濺裝置），以免傳染源或其它有害物濺或灑到面上。
3、 在實(shí)驗室內，必須使用專(zhuān)用的防護性外衣、大褂、罩衫或制服。人員到非實(shí)驗室區域（如，咖啡屋、圖書(shū)館、門(mén)房）時(shí)，防護服必須留在實(shí)驗室內。防護服可以在實(shí)驗室內處理，也可以在洗衣房中洗滌，但不能帶回家中。
4、 可能接觸潛在傳染源、被污染的表面或設備時(shí)，要戴手套。戴兩副手套更合適。明顯污染的手套要處理，當有關(guān)傳染源工作結束時(shí)或手套損傷時(shí)，要去掉手套。一次性手套不用清洗、不能重復使用，不能用于接觸“潔凈”的表面（如鍵盤(pán)、電話(huà)等），也不應當戴著(zhù)到實(shí)驗室外，要備有帶有滑石粉的乳膠手套，脫掉手套后，要洗手。
四、實(shí)驗室設施（第二道屏障）
1、 遏制病源的設施應該有帶鎖的門(mén)（見(jiàn)42CFR 72.6）另發(fā)。
2、 新建實(shí)驗室選址要遠離公共場(chǎng)所。
3、 每個(gè)實(shí)驗室有一個(gè)洗手池。
4、 實(shí)驗室設計要便于清洗，實(shí)驗室內不適宜用地毯。
5、 實(shí)驗臺表面應能防水、耐熱、耐有機溶劑、耐酸堿和耐用于工作臺面及設施消毒的其它化學(xué)物質(zhì)。
6、 實(shí)驗室的操作臺應能隨預期的重量并符合使用要求。實(shí)驗臺、安全柜以及設備之間的空間應便于打掃。實(shí)驗室使用的椅子及其它器具，應覆蓋易于清洗的非織物。
7、 安裝生物安全柜時(shí)，要考慮到房間的通風(fēng)和排風(fēng)，不會(huì )導致生物安全柜超出正常參數運行。生物安全柜應遠離門(mén)、遠離能打開(kāi)的窗，遠離行走區，遠離其它可能引起風(fēng)壓混亂的設備，保證生物安全柜氣流參應有數在有效范圍內。
8、 眼睛沖詵裝置。
9、 光線(xiàn)適宜于開(kāi)展所有的工作，避免反光和閃光，以免妨礙視覺(jué)。
10、 的通風(fēng)要求。添置新設備時(shí)，應考慮機械通風(fēng)系統輸送的氣流不會(huì )造成實(shí)驗室外部空氣的循環(huán)。如果實(shí)驗室有對著(zhù)外面的窗子，應裝防止蒼蠅的窗紗。
生物安全三級（BSL-3）
BSL-3應用于臨床、診斷、教學(xué)、研究或者生產(chǎn)設施，在該級別中開(kāi)展有關(guān)內源性和外源性病源的工作，若因暴露而吸入該病源會(huì )引起嚴重的、可能致死的疾病。實(shí)驗人員應在處理致病性的可能使人致死的病源方面受過(guò)專(zhuān)業(yè)訓練，并由對該病源工作有經(jīng)驗的、有資格的科學(xué)工作者監督。
所有與傳染源操作有關(guān)的步驟，都在生物安全柜或其它物理遏制裝置中進(jìn)行，或由穿戴合適防護服及設施的實(shí)驗人員進(jìn)行，實(shí)驗室經(jīng)過(guò)特殊設計和施工。
然而，應該認識到現有有些設施，不一定滿(mǎn)足BSL-3的所有要求（即，雙門(mén)進(jìn)入工作區和密封問(wèn)題）。在這種情況下，在BSL-2設施中開(kāi)展常規操作（如，診斷程序中用于鑒定；分型、敏感性測試的病源繁殖），其安全級別也可接受，但還需做到：1）將實(shí)驗室內廢氣排出室外；2）實(shí)驗室的通風(fēng)經(jīng)過(guò)平衡以向室內提供定向氣流；3）工作時(shí)，禁止進(jìn)入實(shí)驗室；4）嚴格遵照或使用BSL-3中推薦的標準微生物操作、特殊操作和安全設備。只在實(shí)驗室主任可作出對BSL-3推薦的修訂方法進(jìn)行補充的決定。
以下的標準和特殊安全操作、設備及設施和BSL-3病源有關(guān)：
一、 標準微生物操作
1、 實(shí)驗時(shí)，由實(shí)驗室主任決定限制或禁止進(jìn)入實(shí)驗室。
2、 接觸傳染源的人員在離開(kāi)實(shí)驗室取下手套后，要洗手。
3、 實(shí)驗室內嚴禁飲食、吸煙、清洗隱型眼鏡和化妝。實(shí)驗室內戴隱型眼鏡的人，也要戴眼鏡和面罩。食品要存放在工作區外專(zhuān)用的櫥柜和冰箱中。
4、 不能用嘴移液，只能用機械裝置移液。
5、 制定銳器安全使用規范。
6、 所有的操作過(guò)程應盡量細心，避免產(chǎn)生氣溶膠。
7、 至少每天一次或有活體灑出時(shí)，對工作臺面進(jìn)行消毒。
8、 所有的培養物、儲存物及其它規定的廢物在釋放前，均應使用可行的消毒方法進(jìn)行消毒，如高壓滅菌。轉移到就近實(shí)驗室消毒的物料應置于耐用、防漏容器內，密封運出實(shí)驗室。來(lái)自BSL-3實(shí)驗室的傳染性廢物轉移至他處釋放前應消毒。
9、 實(shí)施控制昆蟲(chóng)和齲齒動(dòng)物的程序（參見(jiàn)附錄G）（另發(fā)）
二、特殊操作
1、 實(shí)驗時(shí)，關(guān)閉實(shí)驗室的門(mén)。
2、 實(shí)驗室主任對進(jìn)入實(shí)驗室進(jìn)行控制，限制項目有關(guān)人員及輔助人員進(jìn)入。一般情況下，易感人員或感染后會(huì )出現嚴重后果的人員，不允許進(jìn)入實(shí)驗室或動(dòng)物房，例如，患有免疫缺陷或免疫抑制的人，其被感染的危險性增加。實(shí)驗室主任對每種情況的估計和決定誰(shuí)能進(jìn)入實(shí)驗室或動(dòng)物房工作，負有最終責任，未成年人不得進(jìn)入實(shí)驗室。
3、 實(shí)驗室主任應制定規章和程序，只有告知潛在風(fēng)險并符合進(jìn)入實(shí)驗室特殊要求（如，經(jīng)過(guò)免疫接種）、遵守進(jìn)出程序的人，才能進(jìn)入實(shí)驗室和動(dòng)物房。
4、 當實(shí)驗室或遏制設施中有傳染源和感染動(dòng)物時(shí)，所有實(shí)驗室和動(dòng)物房入口處，應貼有危警告標志和常用的生物危險符號，并顯示以下信息：有關(guān)病源、實(shí)驗室主任和有關(guān)責任人的姓名和電話(huà)表、進(jìn)入實(shí)驗室的特別要求（如，必須免疫、戴口罩或采取其它的個(gè)人防護措施）。
5、 實(shí)驗室人員接受適當的和實(shí)驗室中處理或將要處理的病源有關(guān)的免疫接種或測試（如，乙肝免疫接種或TB皮試），并建議根據所處理的病源定期進(jìn)行皮試。
6、 適當時(shí)，收集和儲存適合于所有實(shí)驗室人員和其它有風(fēng)險人員使用的基本血清樣品。根據所處理病源或實(shí)驗室的功能，應定期收集其它血清樣品。
7、 實(shí)驗室主任應制定實(shí)驗室專(zhuān)用生物安全手冊，標準操作程序中要包括生物安全預防措施，要告知實(shí)驗人員特殊風(fēng)險，實(shí)驗人員要要閱讀，并在操作和程序中遵照執行。
8、 實(shí)驗人員及其輔助人員應接受適當的培訓，包括和工作有關(guān)的可能存在的風(fēng)險、防止暴露的必要措施和暴露評估程序。當程序必需改變時(shí)，有關(guān)人員必須每年更新知識，接受附加培訓。
9、 實(shí)驗室主任有責任確保在涉及BSL-3的微生物工作開(kāi)展之前，所有人員熟練掌握標準微生物操作及技能，熟練掌握特殊實(shí)驗室設施的操作和運行，其中可能包括人致病菌或細胞接著(zhù)物處理的重要技術(shù)，或由實(shí)驗室主任或其它熟悉于微生物安全操作及技能的、稱(chēng)職的科研工作者提供的特殊培訓課程。
10、 必須常對所有污染的銳器采取高度預防措施，包括針頭和注射器、玻片、移液管、毛細管和手術(shù)刀。
a、 針和注射器或其它銳器應限制在實(shí)驗室內，類(lèi)似灌腸、靜脈切開(kāi)放血、或實(shí)驗動(dòng)物液體吸出等，可以用其它器具的，就不用銳器?？赡軙r(shí)，用塑料器具代替玻璃器具。
b、 注射和吸取感染材料時(shí)，只能使用針頭固定注射器或一次性注射器即注射器和針頭是一體的）。用過(guò)的一次性針頭必須彎曲、切斷、破碎、重新套上針頭套、從一次性注射器上去掉，或在丟棄前進(jìn)行人工處理，要不將之小心放入不會(huì )被刺穿的、用于收集廢棄銳器的容器中。非一次性銳器必須放置在堅壁容器中，轉移至處理區消毒，最好高壓殺菌。
c、 適當時(shí)，使用帶針頭套的注射器、無(wú)針頭的系統和其它安全措施。
d、 打碎的玻璃器皿不能直接用手處理，必須用其它工具處理，如刷子和簸箕、夾子或鑷子。盛污染的針頭、銳器、碎玻璃的容器在倒掉前，應按照地方、州、聯(lián)邦規定進(jìn)行消毒。
11、 與傳染源有關(guān)的開(kāi)放操作，都應在遏制設施內的生物安全或其它物理遏制設備中進(jìn)行。不許在開(kāi)放的實(shí)驗臺上、并在開(kāi)放的設施中開(kāi)展工作。用背面為塑料質(zhì)地的紙擦拭生物安全柜內的無(wú)孔臺面，便于清潔。
12、 按日常程序，在有關(guān)傳染源的工作結束后、尤其是傳染源灑出或濺出后、或受到其它傳染源污染后，實(shí)驗室設備和工作臺面應當使用有效的消毒劑消毒。
a、 灑出的傳染源需由專(zhuān)業(yè)人員、或由經(jīng)過(guò)適當培訓且配有裝備的處理高濃度傳染源的人員進(jìn)行消毒、處理、清洗。制定并公布可能造成濺灑的實(shí)驗程序。
b、 污染的設備，在離開(kāi)設施送去修理、維護或打包運輸前，要按照地方、州或聯(lián)邦的規定消毒。
13、 培養物、組織，體液標本，或具有潛在傳染性的廢物要放入容器中，以防在收集、處理、儲存、運輸或裝卸過(guò)程中泄露。
14、 實(shí)驗室里氖可能被污染的廢棄物品（如：手套、實(shí)驗室外套等），在丟棄或重新使用之前，必須經(jīng)過(guò)消毒。
15、 灑漏或偶然事件中，明顯或可能暴露于傳染源時(shí)，要立即向實(shí)驗室主任報告。進(jìn)行適當的醫學(xué)評估、觀(guān)察、治療，保留書(shū)面記錄。
三、安全設備（第一道屏障）
1、 進(jìn)入實(shí)驗室時(shí)，要穿上實(shí)驗防護服，如，前襟一體或后系式大褂、干凈的外套或連褲服。不得在實(shí)驗室外穿防護服。重復使用的衣服在清洗前要消毒，衣服被明顯污染后應更換。
2、 在處理傳染源、感染動(dòng)物及被污染的儀器時(shí)，必須戴手套。
3、 建議經(jīng)常更換手套和洗手，一次性手套不能重復使用。
4、 有關(guān)傳染源的所有操作、感染動(dòng)物的驗尸、從感染動(dòng)物或動(dòng)物胚胎卵采集組織或液體等，都應在II級或III級生物安全柜中進(jìn)行（見(jiàn)附4）（另發(fā)）。
5、 當操作不能不在生物安全柜中進(jìn)行時(shí)，應適當的綜合使用個(gè)人防護設施（如，口罩，面罩等）和物理遏制設施（如：帶安全罩或密封轉頭的離心機）
6、 當進(jìn)入內有感染動(dòng)物的房間時(shí)，應采取呼吸和面部保護措施。
四、 實(shí)驗室設施（第二道屏障）
1、 實(shí)驗室要離開(kāi)建筑物內的行走區，禁止隨便進(jìn)入實(shí)驗室。進(jìn)入走道后，至少需要經(jīng)過(guò)兩面三刀道自動(dòng)門(mén)，才能進(jìn)入實(shí)驗室。所有的門(mén)都應有鎖（見(jiàn)附錄F）（另發(fā)）。過(guò)道里可以設計一個(gè)更衣室。
2、 每個(gè)實(shí)驗室有一個(gè)洗手池，洗手池的操作應該是免接觸式或全自動(dòng)的，洗手池應安裝在門(mén)口附近。
3、 處理BSL-3病源的區域，墻面、地面、天花板應易于清洗、消毒；若有接縫，應密封；表面應光滑防水；對實(shí)驗室常用化學(xué)試劑和消毒劑具有耐腐蝕性。地板應整體、防滑，建議在地板凹處使用掩蔽罩。墻面、地面、天花板都不應留有縫隙，或在設施消毒時(shí)能夠密封。
4、 實(shí)驗臺表面應能防水、耐熱、耐有機溶劑、耐酸堿和用于工作臺面及設施消毒的其它化學(xué)物質(zhì)。
5、 實(shí)驗室的操作臺應能承受預期的重量，實(shí)驗臺、安全柜以及設備間的空間便于打掃。實(shí)驗室使用的椅子及其它器具，應覆蓋易于清洗的非織物。
6、 所有的窗門(mén)必須關(guān)閉和密封。
7、 在實(shí)驗垃圾處理及其使用方法，該設施最好設在實(shí)驗室內（即，高壓鍋、化學(xué)消毒劑、焚燒爐、其它可行的消毒方法）。應有消毒設備使用方法。若垃圾運出實(shí)驗室，應適當密封，并不應通過(guò)公共通道運送。
8、 應配置生物安全柜，安全柜放置地點(diǎn)應遠離門(mén)、房間通風(fēng)百葉窗、實(shí)驗室內行走區。
9、 應有管道化的排氣系統，該系統進(jìn)入實(shí)驗室的風(fēng)向應從“潔凈區”到“污染區”。排出的空氣不再循環(huán)至建筑物內的任何其它區域。排出的空氣不需要過(guò)濾或作其它處理，但也要依所處場(chǎng)所的要求、特殊病源操作、使用條件而定。外部排氣口要遠離有人區、進(jìn)風(fēng)口，否則需要經(jīng)過(guò)IIFPA過(guò)濾。實(shí)驗人員必須證實(shí)進(jìn)入實(shí)驗室的風(fēng)向是正確的。建議在實(shí)驗室的入口處設置可視的監視裝置，表明和證實(shí)進(jìn)風(fēng)的風(fēng)向。要考慮安裝HVAC系統。防止實(shí)驗室持續正向增壓。應安裝聲音報警裝置，警告實(shí)驗人員HVAC系統出了問(wèn)題。
10、 若生物安全柜至少每年經(jīng)過(guò)測試和確認，則二級生物安全柜排出的、經(jīng)過(guò)HEPA過(guò)濾的空氣，可進(jìn)入實(shí)驗室循環(huán)。當二級生物安全柜通過(guò)建筑物排出空氣時(shí)，安全柜的排氣管路的連結，應避免對安全柜的空氣平衡或建筑物排氣系統的空氣平衡產(chǎn)生干擾（如，在安全柜排氣管和排氣管道間形成空氣隙）。當使用三級生物安全柜時(shí)，要和排氣系統直接連結。若三級安全柜和供氣系統相連，應避免安全柜正向增壓（見(jiàn)附A）
11、 會(huì )產(chǎn)生氣溶膠的連續流離心機及其它設備應在一個(gè)裝置中，該裝置通過(guò)HEPA過(guò)濾器排出空氣，而避免直接排入實(shí)驗室中。至少每年測試HEPA系統。另外，當遠離有人區或進(jìn)風(fēng)口時(shí)，該設備排出的空氣可以排到外面。
12、 真空管路由液體消毒劑汽水閥和HEPA過(guò)濾器及類(lèi)似設備保護。需要時(shí)，要更換過(guò)濾器。另外，可以使用手提真空泵（也需要由汽水閥和過(guò)濾器正確保護）。
13、 實(shí)驗室內應有眼睛沖洗裝置。
14、 光線(xiàn)宜于開(kāi)展所有的工作，避免反光和閃光，以免妨礙視覺(jué)。
15、 BSL-3設施的設計和操作程序必須文件化。設施必須經(jīng)過(guò)測試以確認設計和操作參數在系統運轉前已達到的要求。因操作經(jīng)驗，會(huì )改操作程序，所以設施必須反復測試，每年至少一次。
16、 若有關(guān)病源陳述（根據風(fēng)險分析、場(chǎng)所條件、其它聯(lián)邦/州/地方法規而定）中要求，則應采取其它環(huán)境保護措施（如，實(shí)驗人員淋浴、排出空氣的HEPA過(guò)濾、其它管道設施的遏制處理、液體消毒劑的供應）。
生物安全四級（BSL-4）
有些危險的外源性病源，具備因氣溶膠傳播而致實(shí)驗室感染和導致生命危險疾病的高度個(gè)體風(fēng)險，有關(guān)工作應在BSL-4實(shí)驗室中開(kāi)展。和BSL-4病源有相近或特定抗原關(guān)系的病源除外。實(shí)驗室成員應在處理特別危險的傳染源方面受過(guò)特殊和全面的訓練，應了解標準和特殊操作中一級和二級遏制的作用、遏制設備、實(shí)驗室設計性能。實(shí)驗由在有關(guān)病源方面受過(guò)訓練、并有工作經(jīng)驗的、有資格的科學(xué)工作者監督。實(shí)驗室主任嚴格控制進(jìn)入實(shí)驗室。設施應在獨立的建筑物內；或在建筑物的一個(gè)控制區內，但和建筑物內的其它區域完全隔離。應制定、實(shí)施特殊設施操作手冊。
在設施的工作區內，所有工作應限制在三級生物安全柜中；或在二級生物安全柜中，但得使用裝備生命支持系統的一體正壓防護服。BSL-4實(shí)驗室經(jīng)過(guò)特殊設計，是一個(gè)特殊的工程，可以防止微生物向環(huán)境中擴散。
以下的標準和特殊安全操作、設備及設施和BSL-4病源有關(guān)。
一、 微生物操作
1、 實(shí)驗時(shí)，由實(shí)驗室主任決定限制進(jìn)入實(shí)驗室。
2、 要制定銳器的安全使用規范。
3、 所有的操作過(guò)程應盡量細心，避免產(chǎn)生氣溶膠。
4、 至少每天一次或有活體灑出時(shí)，對工作臺面進(jìn)行消毒。
5、 所有廢物在釋放前，應使用可行的方法消毒，如高壓滅菌。
6、 實(shí)施控制昆蟲(chóng)和齲齒動(dòng)物的程序（參見(jiàn)附錄G）（另發(fā)）
二、 特殊操作
1、 只有在實(shí)驗過(guò)程中或輔助需要而必須進(jìn)入設施或獨立實(shí)驗室的實(shí)驗人員，才能授權進(jìn)入?；加忻庖呷毕莼蛎庖咭种频娜?，存在被感染的危險。另外，對于感染風(fēng)險大的人，因感染而會(huì )致特殊危險的人，如兒童或孕婦，不準進(jìn)入實(shí)驗室或動(dòng)物房。監督者對每種情況的估計和決定誰(shuí)能進(jìn)入實(shí)驗室工作負有最終責任。通過(guò)安全措施（如鎖上門(mén)）限制進(jìn)入實(shí)驗室。實(shí)驗室主任、風(fēng)險控制負責人、設施物理安全負責人控制人員進(jìn)入。進(jìn)入前，要告知潛在危險，通知采取適當安全防護以保證安全。授權進(jìn)入者要執行通知規定，執行現行所有其它進(jìn)出程序。所有人要作工作日志，記錄每次進(jìn)出日期、時(shí)間。應建實(shí)用有效的緊急情況處理程序。
2、 當實(shí)驗室或動(dòng)物房中有傳染源和感染動(dòng)物時(shí)，據入口處的門(mén)上應貼有危險警告標志和常用的生物危險符號，并標明以下信息：有磁病源、實(shí)驗室主任和其它責任人的姓名表、并表明進(jìn)入該區的所有特別要求（如，必須免疫或戴口罩）。
3、 實(shí)驗室主任有責任確保在涉及BSL-4的微生物工作開(kāi)展之前，所有人員非常熟練掌握標準微生物操作及技能，熟練掌握特定實(shí)驗室設施的特殊操作和運行，其中可能包括人致病菌或細胞培養物處理的重要經(jīng)驗，或由實(shí)驗室主任或其它熟悉于獨特的微生物安全操作及技能的、有資格的科研工作者提供的特殊培訓課程。
4、 實(shí)驗室人員接受有效的和實(shí)驗室中將要處理的病源有關(guān)的免疫接種。
5、 適當時(shí)，收集和儲存適合于所有實(shí)驗室人員和其它有風(fēng)險人員使用權的基本血清樣品。根據所處理病源或實(shí)驗室的功能，應定期收集其它血清樣品。決定建立血清學(xué)監督程序時(shí)，應當考慮能否得到有關(guān)病源的抗體測試，并將測試結果通知參與者。
6、 實(shí)驗室主任應制定使用生物安全手冊。要告訴實(shí)驗人員特殊風(fēng)險，實(shí)驗人員要閱讀，并在操作唾程序中遵照執行。
7、 實(shí)驗人員及其輔助人員應接受適當的培訓，包括和工作有關(guān)的可能存在的風(fēng)險、防止暴露的很必要措施和暴露評估程序。當程序必需改變時(shí)，有關(guān)人員必須每年更新知識，接受附加培訓。
8、 人員只有通過(guò)更衣間和淋浴室進(jìn)出實(shí)驗室。每次離開(kāi)實(shí)驗室時(shí)，淋浴消毒。僅在緊急情況下，使用氣塞進(jìn)出實(shí)驗室。
9、 在外更衣間脫掉并保存日常衣服。所有進(jìn)入實(shí)驗室的人員，應有并使用整套實(shí)驗服，包括內衣、緊身襯褲和襯衫或連衣褲工作服、鞋子、手套。當離開(kāi)實(shí)驗室并進(jìn)入淋浴區前，在內更衣間脫掉實(shí)驗服。衣服清洗前高壓殺菌。
10、 設施中所需用品和物料通過(guò)雙門(mén)高壓鍋、煙熏消毒艙、或氣塞送入。每次使用后，要對這些裝置適當消毒。雙門(mén)高壓鍋、煙熏消毒艙、或氣塞外面的門(mén)牢固的關(guān)上后，設施內的人員打開(kāi)里側的門(mén)取出物料。物料送入設施后，門(mén)上保險。
11、 必須經(jīng)常對所有污染的銳器采取高度預防措施，包括針頭和注射器、玻片、移液管、毛細管和手術(shù)刀。
a、 針和注射器或其它銳器應限制在實(shí)驗室內，類(lèi)似灌腸、靜脈切開(kāi)放血、或實(shí)驗動(dòng)物液體吸出等，可以用其它器具的，就不要用銳器?？赡軙r(shí)，用塑料器具代替玻璃器具。
b、 注射和吸取感染材料時(shí)，只能使用針頭固定注射器或一次性注射器（即注射器和針頭是一體的）。用過(guò)的一次性針頭必須彎曲、切斷、破碎、重新套上針頭套、從一次性注射器上去掉，或在丟棄前進(jìn)行人工處理，要將之小心放入還會(huì )被刺穿的、用于收集廢棄銳器的容器中，非一次性銳器必須放置在堅壁容器中，轉移至處理區消毒，最好高壓殺菌。
c、 適當時(shí)，使用帶針頭套的注射器、無(wú)針頭的系統和其它安全設施。
d、 打碎的玻璃器皿不能直接用手處理，必須用其它工具處理，如刷子和簸箕、夾子或鑷子。盛污染的針頭、銳器、碎玻璃的容器在倒掉前，應按照地方、州、聯(lián)邦的規定進(jìn)行消毒。
12、 從三級生物安全柜和BSL-4實(shí)驗室轉移的活的或完整的生物材料應轉入不易破碎的、密封的第一級容器中，然后由不易破碎的、密封的第二級容器包裹。通過(guò)專(zhuān)用的殺菌浸泡罐、煙熏消毒艙或氣塞轉移設施。
13、 除了需要保持活性或完整狀態(tài)的生物材料外，除非在離開(kāi)實(shí)驗室前高壓殺菌或消毒，任何材料不得轉移出BSL-4實(shí)驗室?？赡鼙桓邷鼗蛘魵鈿牡脑O備和材料，可通過(guò)氣體或煙霧的方法在專(zhuān)用氣塞或艙中消毒。
14、 在有關(guān)傳染源的工作結束后，尤其是傳染源灑出或濺出后或受到其它傳染源污染后，實(shí)驗室設備應當進(jìn)行日常消毒。設備送去維修或保養前應消毒。
15、 灑出的傳染源需由適當的專(zhuān)業(yè)人員或由經(jīng)過(guò)適當培訓且配有裝備的處理高濃度傳染源的人員進(jìn)行處理、清洗。在實(shí)驗室內，制定并公布可能造成濺灑的實(shí)驗程序。
16、 建立一個(gè)體系，報告實(shí)驗事故，暴露員工長(cháng)期曠工以及潛在的和實(shí)驗室相關(guān)的疾病的醫療監督。做好并保存書(shū)面記錄。和報告一監督體系關(guān)系重大的是，得到檢疫、隔離、和對潛在或已知患實(shí)驗室相關(guān)疾病的人員的進(jìn)行治療的設施。
17、 和所進(jìn)行的實(shí)驗工作無(wú)關(guān)的材料（如，植物、動(dòng)物和衣服）不允許帶入設施。
三、 安全設備（第一道屏障）
設施內的所有程序都在三級生物安全柜中進(jìn)行，或者穿裝備生命系統的一體的正壓個(gè)人防護服，在二級生物安全柜中進(jìn)行。
四、 實(shí)驗室設施（第二道屏障）
BSL-4實(shí)驗室有兩種模型：生物安全柜實(shí)驗室，所有的病源處理均在三級安全柜中進(jìn)行；防護服實(shí)驗室，實(shí)驗人員穿防護服。也可以在同一設施中，兩面三刀種模型結合。若結合使用，每種模型必須符合該模型的所有要求。
（一） 生物安全柜實(shí)驗室（見(jiàn)附1）
1、 BSL-4實(shí)驗室為獨立的建筑物或建筑物內有明確界線(xiàn)的獨立區。設施內的房間作如下安排，至少通過(guò)兩道門(mén)后，才進(jìn)入有三級生物安全柜的房間（生物安全柜室）。供進(jìn)出生物安全柜室用的外內更衣間通過(guò)淋浴室隔開(kāi)。不能通過(guò)更衣間進(jìn)入生物安全柜的材料、用品、設備，可通過(guò)設有雙門(mén)高壓鍋、浸泡缸、煙熏消毒艙或勇氣間的遏制屏障處（用于消毒）進(jìn)入。
2、 實(shí)驗開(kāi)始前，每天檢查所有的控制參數（如，氣流方向）和生命支持系統，保證實(shí)驗室按照其運轉參數運轉。
3、 生物安全柜和內更衣間的墻面、地面、天花板建成密封的內殼，以便于煙熏、防止動(dòng)物和昆蟲(chóng)進(jìn)出。地板整體密封、覆蓋。內殼的內表面耐液體和化學(xué)試劑，便于該區域清潔和消毒。有關(guān)結構和表面的所有裂縫均密封，便于消毒。生物安全柜室地板上的任何排水管直接進(jìn)入廢液消毒系統中。下水道開(kāi)口和其它管道含有HEPA過(guò)濾器，防止動(dòng)物。
4、 實(shí)驗臺表面一體或密封，防水、耐熱、耐有機溶劑，耐酸堿和用于工作臺面及設施消毒的其它化學(xué)物質(zhì)。
5、 實(shí)驗室的操作臺開(kāi)口結構簡(jiǎn)單，能承受預期的重量并符合使用要求。實(shí)驗臺、安全柜以及設備之間的空間應便于打掃、消毒。實(shí)驗室
